[发明专利]脐血血小板线粒体在制备治疗自身免疫疾病药物中的应用有效
申请号: | 202010894223.2 | 申请日: | 2020-08-31 |
公开(公告)号: | CN112156111B | 公开(公告)日: | 2022-10-18 |
发明(设计)人: | 赵莲 | 申请(专利权)人: | 中南大学湘雅三医院 |
主分类号: | A61K35/19 | 分类号: | A61K35/19;A61P37/02;C12N5/078 |
代理公司: | 长沙智嵘专利代理事务所(普通合伙) 43211 | 代理人: | 李婷婷 |
地址: | 410013 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 血小板 线粒体 制备 治疗 自身免疫 疾病 药物 中的 应用 | ||
本发明公开了一种脐血血小板线粒体在制备治疗自身免疫疾病药物中的应用,从脐血中分离出的血小板线粒体,用于制备治疗自身免疫疾病的药物。本发明之用脐血血小板线粒体制备的治疗自身免疫疾病的药物的应用,其治疗效果好,副作用较小,脐血血小板线粒体易于保存,并具备线粒体的功能稳定等特点。通过体内、体外实验测试,其结果表明脐血血小板线粒体对自身免疫疾病的治疗效果明显。
技术领域
本发明涉及生物制药领域,特别地,涉及一种脐血血小板线粒体在制备治疗自身免疫疾病药物中的应用。
背景技术
炎性肠病、1型糖尿病、系统红斑狼疮、风湿性关节炎等自身免疫疾病的发病率逐年增加,已成为全球关注的健康问题。自身免疫疾病的原因尚不清楚,但这些疾病有一个共同特征就是免疫系统出现紊乱,机体的免疫细胞将自身组织当作外源抗原,攻击并损伤自身组织,引起慢性炎症。然而,目前没有有效的治愈方法。目前常采用的免疫抑制药物、激素疗法等对自身免疫患者进行治疗,但是只能减少症状,并有严重长期的副反应。因此,急需安全有效的药物或方法治疗自身免疫性疾病。
发明内容
本发明提供了一种脐血血小板线粒体在制备治疗自身免疫疾病药物中的应用,以克服现有技术的不足,尤其是克服现有技术治疗自身免疫性疾病的药物效果不够好、副作用大的的不足,提供一种脐血血小板线粒体在制备治疗自身免疫疾病药物中的应用。
本发明要解决的另一个技术问题是,提供一种治疗自身免疫疾病的药物,其治疗效果好,副作用较小。
本发明采用的技术方案如下:
脐血血小板线粒体在制备治疗免疫性疾病药物中的应用,从脐血中分离出的血小板线粒体,用于制备治疗自身免疫疾病的药物。
进一步地,脐血血小板线粒体的使用浓度:10μg/mL~2000μg/mL。采用生理盐水溶解脐血血小板线粒体制备成液体状。给药途径采用注射。
进一步地,脐血血小板线粒体冻存于-80℃条件下。
进一步地,免疫性疾病包括炎性肠病、1型糖尿病、系统红斑狼疮、风湿性关节炎。
根据本发明的另一方面,还提供一种包括上述脐血血小板线粒体的分离方法,包括以下步骤:
S1、取脐血加至淋巴细胞分离液中,离心,离心结束后,脐血分层,吸取上清液;
S2、将步骤S1中的上清液进行离心处理,去除沉淀,收集上清液;
S3、将步骤S2中收集的上清液与生理盐水混匀,离心,去除上清液,收集沉淀的粗品血小板;
S4、采用血小板洗涤液重悬步骤S3中的血小板,混匀进行离心,再重复重悬、离心两次,去除上清液,获得脐血血小板;
S5、采用线粒体抽提试剂盒对脐血血小板进行抽提,获得脐血血小板线粒体。
进一步地,步骤S1中脐血加与淋巴细胞分离液的体积比为1∶1,离心条件为:20℃,400g~1610g,25min,开始加速度:0,结束时减速度:0。步骤S2中离心条件为:20℃,300g,10min,开始加速度:+8,结束时减速度:-9。
进一步地,步骤S3中上清液与生理盐水的体积相同,离心条件为:20℃,2000g~4000g,5min~20min,开始加速度:+8,结束时减速度:-9。步骤S4中血小板洗涤液为生理盐水,离心条件为:20℃,2000g~4000g,5min~20min,开始加速度:+8,结束时减速度:-9,重复洗涤2次。
本发明具有以下有益效果:
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