[发明专利]大豆E2/GIGANTEA同源基因定量PCR引物及其应用在审
申请号: | 202010895402.8 | 申请日: | 2020-08-31 |
公开(公告)号: | CN111876520A | 公开(公告)日: | 2020-11-03 |
发明(设计)人: | 蒋炳军;孙石;韩天富;武婷婷;袁珊 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 魏少伟 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 大豆 e2 gigantea 同源 基因 定量 pcr 引物 及其 应用 | ||
1.引物组合,包括引物对Ⅰ、引物对Ⅱ和引物对Ⅲ;
所述引物对Ⅰ由引物Glyma.10G221500-F和引物Glyma.10G221500-R组成;
所述引物Glyma.10G221500-F为如下(a1)或(a2):
(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子;
(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子;
所述引物Glyma.10G221500-R为如下(a3)或(a4):
(a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子;
(a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子;
所述引物对Ⅱ由引物Glyma.16G163200-F和引物Glyma.16G163200-R组成;
所述引物Glyma.16G163200-F为如下(a5)或(a6):
(a5)序列表的序列3所示的单链DNA分子;
(a6)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子;
所述引物Glyma.16G163200-R为如下(a7)或(a8):
(a7)序列表的序列4所示的单链DNA分子;
(a8)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子;
所述引物对Ⅲ由引物Glyma.20G170000-F和引物Glyma.20G170000-R组成;
所述引物Glyma.20G170000-F为如下(a9)或(a10):
(a9)序列表的序列5所示的单链DNA分子;
(a10)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的DNA分子;
所述引物Glyma.20G170000-R为如下(a11)或(a12):
(a11)序列表的序列6所示的单链DNA分子;
(a12)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同功能的DNA分子。
2.权利要求1所述的引物组合的应用,为如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4):
(b1)检测大豆E2/GIGANTEA同源基因表达量;
(b2)检测大豆E2/GIGANTEA同源基因表达模式;
(b3)大豆生长习性检测;
(b4)大豆生物节律钟检测。
3.权利要求1所述的引物组合在制备试剂盒中的应用;所述试剂盒的用途为如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4):
(b1)检测大豆E2/GIGANTEA同源基因表达量;
(b2)检测大豆E2/GIGANTEA同源基因表达模式;
(b3)大豆生长习性检测;
(b4)大豆生物节律钟检测。
4.含有权利要求1所述引物组合的试剂盒;所述试剂盒的用途为如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4):
(b1)检测大豆E2/GIGANTEA同源基因表达量;
(b2)检测大豆E2/GIGANTEA同源基因表达模式;
(b3)大豆生长习性检测;
(b4)大豆生物节律钟检测。
5.权利要求4所述试剂盒的制备方法,包括将各条引物单独包装的步骤。
6.大豆E2/GIGANTEA同源基因表达量或表达模式检测方法,包括如下步骤:以待测大豆的cDNA为模板,采用权利要求1所述引物组合进行定量PCR检测,得到大豆E2/GIGANTEA同源基因表达量或表达模式结果。
7.大豆生物节律钟检测方法,包括如下步骤:以待测大豆的cDNA为模板,采用权利要求1所述引物组合进行定量PCR检测,得到大豆E2/GIGANTEA同源基因表达量在一定时间内的变化趋势,研究大豆生物节律钟变化规律。
8.如权利要求2至7任一所述的应用或试剂盒或方法,其特征在于:所述大豆E2/GIGANTEA同源基因为Glyma.10G221500和/或Glyma.16G163200和/或Glyma.20G170000。
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