[发明专利]烟草黑胫病预警基因Ntab0278480及其应用

说明书

本发明属于烟草基因组解析和烟草栽培技术领域，具体涉及一个烟草黑胫病预警基因及其应用专利申请事宜。烟草黑胫病预警基因Ntab0278480的碱基序列如SEQ ID No.2所示，作为预警基因用于指示黑胫病的感染情况。本申请所提供的预警基因，具有响应快速、灵敏度高的技术优点，而且由于是检测烟草基因组（现有技术，多是检测病菌基因组），因此具有便捷的技术优势。本申请不仅可为黑胫病的监测和早期预防奠定一定技术基础，也为其他烟草病害防控提供了借鉴和参考，因此具有较好的应用和科研价值。

技术领域

本发明属于烟草基因组解析和烟草栽培技术领域，具体涉及一个烟草黑胫病预警基因及其应用专利申请事宜。

背景技术

烟草栽培中，真菌、细菌和病毒等多种微生物都会导致烟草病害的发生，同时，蚜虫等具有刺吸式口器的昆虫也会向烟草传播病原体并进而导致其产生病害。而由于微生物个体小，再加上烟草病害的传播途径多样，给烟草病害的发生和流行规律研究带来不小的困难。现有技术中，一般采用病情指数等指标来反映病害的发生、发展和流行规律，但这种评价方法通常要等到发病、甚至开始蔓延后才能够对病害的发生或流行做出判断，而这往往容易延误后续的防治。理论而言，如果能在病原体侵染烟草早期时，就能够通过及时检测到并做出预警，可为后续病害跟踪、病害发展及流行趋势判断奠定良好基础，也可为控制病害大规模的蔓延争取到足够的时间。

烟草黑胫病是一类土传真菌性病害，又称烟草疫病，是世界烟草生产中最具毁灭性的病害之一，也是危害我国烟叶生产的主要病害，在国内主要产烟区均有发生，发病后主要症状为：烟草矮化、根和茎基部坏死、叶片发黄萎蔫，平均发病率为3%～12%，严重时可达50%以上。烟草黑胫病能够使烟株根系活力下降，水分和营养物质运输受阻，直接或间接地影响到烟叶的产量和质量，造成严重的经济损失。

研究表明，烟草黑胫病的传播途径多样，主要初侵染源是带菌的土壤、粪肥及灌溉水，其次为带病烟苗，其产生的孢子囊和游动孢子借雨水或灌溉水传播，可引起再浸染。由于该病害传播范围广，传播途径多样，在烟株体内增殖和转移速度很快，因此提前预防和尽早预警是该病防治的关键。

现有研究中，针对烟草真菌性病害分子生物学检测技术大多数是基于核糖体内转录间隔区（rDNA-ITS）序列设计开发特异性引物，再利用PCR扩增技术进行检测判定。当然，也有根据某些特定保守基因序列比对后结果再设计特异性引物进行PCR扩增、检测和判定所感染真菌类型的。但这些方法多是基于所鉴定病菌真菌自身基因所进行的病害鉴定，实际应用中，也就意味着，只有当烟草感染这种病原真菌、且能够提取获得该病原真菌基因组后才能利用PCR方法进行鉴定，从而导致该此类方法在应用时具有很大局限性。因此，如何更为快速的对烟草所能遭受的病原真菌进行鉴定，对于相关病害防控具有十分重要的技术意义。

发明内容

针对烟草黑胫病，本申请目的在于提供两个能够在黑胫病感染早期即可快速响应的预警基因，从而为黑胫病的早期预防奠定良好技术基础。

本申请所采取的技术方案详述如下。

烟草黑胫病预警基因Ntab0295850和Ntab0278480，其碱基序列分别如SEQ IDNo.1和SEQ ID No.2所示，具体如下：

Ntab0295850基因序列（237 bp，SEQ ID No.1），具体如下：

GGCTATGGAAATGTATCGGCGAATCATCGGAACATGAACAAGAGGATGATGGAGTTTTTGAAAAAGAGTTGGATTCCTAAAATTGGAGAAGTGAAAATGGAAAGAGAGAAAGTGCATAAACATATGATTAAAGAGAGGATTAGAAGAGAAAAGCAGAAGCAGAGTTATTTGGATTTGCATAAATTGCTCCCAATGGGAACCAAGGGTGAGAAGAATGCTATAGTCCAAACAGCAGCA；

Ntab0278480基因序列（191 bp，SEQ ID No.2），具体如下：