[发明专利]一种检测COVID-19抗体的免疫层析试剂盒及制备方法

权利要求书

1.一种检测COVID-19抗体的免疫层析试剂盒，其特征在于，其包括盒体(1)和设置在所述的盒体(1)中的免疫层析试纸条(2)；所述的免疫层析试纸条(2)包括有相互接触的标记垫(22)和反应垫(23)；所述的标记垫(22)上包被有胶体金标记的新型冠状病毒S蛋白、胶体金标记的鸡IgY抗体；所述的反应垫(23)上设置有包被抗人IgM抗体的M线、包被抗人IgG抗体的G线和包被有羊抗鸡IgY抗体的C线。

2.根据权利要求1所述的一种检测COVID-19抗体的免疫层析试剂盒，其特征在于，所述的盒体(1)包括底卡(11)和盖板(12)，所述的盖板(12)上设置有加样孔(13)和观察窗(14)，所述的盖板(12)固定盖合在底卡(11)上形成包裹免疫层析试纸条(2)的盒体(1)；所述的免疫层析试纸条(2)包括底板以及依次设置在所述的底板上的样品垫(21)、标记垫(22)、反应垫(23)和吸水垫(24)，所述的底板固定在底卡(11)内表面底部，所述的反应垫(23)固定在底板上，所述的标记垫(22)和吸水垫(24)分别叠压在反应垫(23)的两端，并在反应垫(23)的表面形成检测区，所述的样品垫(21)叠压在标记垫(22)上；所述的检测区的反应垫(23)上在靠近标记垫(22)的一侧设置两条检测线区，分别为M线和G线，靠近吸水垫(24)的一侧设置有一条控制线区，为C线。

3.根据权利要求2所述的一种检测COVID-19抗体的免疫层析试剂盒，其特征在于，所述的吸水垫(24)由吸水滤纸制成；所述的反应垫(23)由Millipore180硝酸纤维素膜制成；所述的标记垫(22)由玻璃纤维膜制成，标记垫(22)上的胶体金标记的新型冠状病毒S蛋白的浓度为0.2-1.00mg/mL，胶体金标记的鸡IgY抗体的浓度为0.2-1.0mg/mL；所述的样品垫(21)由经过样品垫(21)处理液浸渍处理过的玻璃纤维膜制成，所述的样品垫(21)处理液成分包括2％的海藻糖、0.5％的酪蛋白钠盐、0.5％的BSA、1％的聚乙烯吡咯烷酮、0.5％的Tween-20、0.2％的TritonX-100，溶解于0.02M的PBS缓冲液，pH＝8.0。

4.根据权利要求1-3任一所述的一种检测COVID-19抗体的免疫层析试剂盒，其特征在于，其还包括样品稀释液，所述的样品稀释液的成分包括体积分数0.1-0.4％的Tween-20、0.1-1％的BSA和0.05-0.2％的Proclin-300，溶解于0.02M的PBS缓冲液，pH＝8.0。

5.一种检测COVID-19抗体的免疫层析试剂盒的制备方法，其特征在于，其包括如下详细步骤：

步骤S1胶体金溶液的制备：采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液；

步骤S2样品垫(21)制备：按产品设计要求将玻璃纤维膜切成大小合适的条状，再用样品垫(21)处理液浸渍处理切好的条状玻璃纤维膜，最后进行干燥处理，保存备用；

步骤S3胶体金标记蛋白结合物的制备：取两份步骤S1制备的胶体金溶液分别加入新型冠状病毒S蛋白和鸡IgY抗体，搅拌5分钟，再加入10％BSA，封闭，离心后弃上清，复溶沉淀；

步骤S4标记垫(22)制备：按产品设计要求将玻璃纤维膜切成大小合适的条状，再将其浸泡到步骤S3制备的胶体金标记蛋白结合物混合溶液中浸泡，取出玻璃纤维膜烘干，保存备用；

步骤S5反应垫(23)制备：用PBS溶液调节抗人IgM抗体、抗人IgG抗体、羊抗鸡IgY抗体的浓度，并将其在检测线区M线、检测线区G、控制线区C线上划膜，烘干备用；

步骤S6吸水垫(24)制备：将吸水滤纸裁切成大小合适的条状；

步骤S7试剂盒组装：在底板上依次粘贴样品垫(21)、标记垫(22)、反应垫(23)、吸水垫(24)，并将其相互搭接成完整的板后切成合适大小置于盒体(1)中。

6.根据权利要求5所述的一种检测COVID-19抗体的免疫层析试剂盒的制备方法，其特征在于，所述的步骤S3中向胶体金溶液中添加的蛋白的量为0.02-0.10mg/mL。

7.根据权利要求6所述的一种检测COVID-19抗体的免疫层析试剂盒的制备方法，其特征在于，所述的步骤S3中的复溶沉淀是用金复溶液复溶沉淀物至初始胶体金溶液的十分之一。