[发明专利]一种从新冠肺炎康复期血浆中制备灭活血清的方法

说明书

本发明提供一种从新冠肺炎康复期血浆中制备灭活血清的方法，将血浆经过冷沉淀离心、有机溶剂处理(S/D灭活)、C18吸附、AEROSIL吸附、硅藻土吸附、超滤透析、巴氏灭活、超滤透析、配制灌装等步骤后，对不稳定的脂蛋白、凝血因子等进行了去除，制备出病毒感染风险低、稳定性好、副作用低、回收率高的灭活血清。

技术领域

本发明涉及防疫领域，尤其涉及一种从新冠肺炎康复期血浆中制备灭活血清的方法。

背景技术

针对新冠肺炎(2019-nCoV)疫情，目前虽有六七种疫苗进入临床，但是还需经过漫长的验证和临床反馈及申报审批等过程，因此可认为目前尚无经研究认证的有效的治疗药物(例如：疫苗、抗病毒药物)。在国家卫生健康委发布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案 (试行第七版)》中，对于病情进展较快、重型、危重型的患者，可采用康复期血浆进行 治疗。核心就是利用康复期患者血浆中含有的抗体，来中和病毒，抑制感染，达到康复，

《康复期血浆应用于急性病毒性传染病现状及其治疗新型冠状病毒肺炎前景》等文章 中综述分析了康复期血浆对于急性脊髓灰质炎患者、埃博拉、大流行流感、SARS和MERS、 甲型H1N1流感、禽流感H5N1等多种急性病毒性传染病的成功应用，并指出康复期血浆 治疗的必要性、紧迫性、安全性、可行性和前景。

目前关于康复期血浆主要是通过亚甲基蓝灭活制备(具体见文献Effectivenessof convalescent plasma therapy in severe COVID-19patients中的PlasmaPreparation Procedure and Quality Control小节)，在专利US20160114037A1和一些论文中都描述过 这种方法，主要是根据《中华人民共和国献血法》及《中国药典》三部(2015版)中血液 制品原料血浆采集标准，筛选符合血浆采集条件的新冠肺炎康复者采集血浆，将血浆装入 一次性亚甲基蓝病毒灭活袋，放入在特制的病毒灭活柜中进行病毒灭活，再过滤去除亚甲 基蓝，最后得到康复期血浆。

通过亚甲基蓝病毒灭活得到的血浆从既往治疗其他传染病的经验看，总体上说是安全 的。但输注血浆仍然有潜在的输血感染病原体的风险和不良反应，包括过敏等。康复期血 浆在分离制备的过程中，需要经过严格的病原体灭活和生物安全性检测，感染风险较小， 但不排除个别处于窗口期的供体病原体检测阴性的情况。其次，在输注康复期血浆的过程 中，有发生输血相关肺损伤的风险，尤其是在已经发生严重肺部炎症的患者，值得注意。 最后，由于血浆成分复杂，蛋白性质不稳定，温度、储存时间等都极易造成蛋白的变性和 沉淀，增加了安全风险。

发明内容

本发明提供一种从新冠肺炎康复期血浆中制备灭活血清的方法，旨在开发一种方法快 速从康复期血浆中制备一种稳定的、安全的、高回收率、低杂蛋白的血清产品。

本发明是通过以下技术方案实现：

一种从新冠肺炎康复期血浆中制备灭活血清的方法，包括如下步骤：

冷沉淀分离：合并血浆通过冷沉淀离心去除大部分的凝血因子、脂蛋白等；

S/D：调整制品参数，采用S/D法灭活去除制品中可能存在的病毒；

C18吸附：去除S/D溶剂；

过滤吸附：采用AEROSIL、Celite503、除脂滤芯过滤等温和的方式吸附和过滤去除脂 蛋白和凝血因子；

巴氏灭活：灭活潜在的病毒，巴氏灭活保护剂目前有两种选择(山梨醇及葡萄糖)，保护效果都能达到预定的要求。

本发明通过采用两步病毒灭活工艺对血浆中可能存在的潜在病毒进行灭活，通过采用 冷沉淀离心、AEROSIL吸附、除脂滤芯过滤等方式对不稳定的脂蛋白、凝血因子等进行了 去除，制备出病毒感染风险低、稳定性好、副作用低、回收率高的灭活血清。

附图说明