[发明专利]Gustavus基因及其应用、由其合成的dsRNA及dsRNA的制备方法与应用有效
申请号: | 202010904420.8 | 申请日: | 2020-09-01 |
公开(公告)号: | CN112029772B | 公开(公告)日: | 2022-06-07 |
发明(设计)人: | 高阳;彭静;张德咏;刘勇;任瑞凡;张卓;朱春晖;程菊娥;郑立敏;史晓斌 | 申请(专利权)人: | 湖南省植物保护研究所 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/113;C12N15/10;A01N57/16;A01P7/04 |
代理公司: | 湖南兆弘专利事务所(普通合伙) 43008 | 代理人: | 陈晖 |
地址: | 410125 湖南省*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | gustavus 基因 及其 应用 合成 dsrna 制备 方法 | ||
1.一种Gust avus基因在防控蚜虫中的应用,其特征在于,所述Gustavus基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示;所述蚜虫为桃蚜,所述应用方法为:抑制蚜虫中Gustavus基因的表达,进而抑制蚜虫的繁殖。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述Gustavus基因以桃蚜的cDNA为模板,以Primer01和Primer02为引物,进行PCR扩增得到;所述Primer01的DNA序列如SEQ ID NO.4所示,所述Primer02的DNA序列如SEQ ID NO.5所示。
3.一种dsRNA的防控蚜虫中的应用,其特征在于,所述dsRNA根据权利要求1所述的Gustavus基因合成;所述dsRNA的核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示;所述蚜虫为桃蚜。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述dsRNA的制备包括以下步骤:
S1、以Gustavus基因的DNA序列为模板,合成Gustavus基因片段;
S2、以Gustavus基因片段作为模板,设计含有T7启动子序列的引物对;
S3、通过PCR扩增得到所述dsRNA合成模板;
S4、体外合成dsRNA。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述S1具体为:根据Gustavus基因的DNA序列设计引物对,以Gustavus基因的DNA序列为模板,进行PCR扩增,得到Gustavus基因片段。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述引物对包括Primer03和Primer04,其中,所述Primer03的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示,所述Primer04的核苷酸序列如SEQ IDNO.7所示;
和/或,所述Gustavus基因片段的DNA序列如SEQ ID NO.2所示。
7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述S2中所述含有T7启动子序列的引物对包括Primer05和Primer06,所述Primer05的DNA序列如SEQ ID NO.8所示;所述Primer06的DNA序列如SEQ ID NO.9所示。
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