[发明专利]一种榛仁蛋白双酶解的工艺方法

说明书

本发明涉及一种榛仁蛋白双酶解的工艺方法，包括如下步骤：步骤一、称取榛仁蛋白粉，加入蒸馏水配制成溶液，加热破坏其蛋白质结构，冷却后搅拌并将其调节至所需pH值；步骤二、在上述溶液中加入目标蛋白酶开始酶解，在酶解反应完成后，对酶解液进行灭活，然后将其冷却到第二次酶解反应所需的温度；步骤三、加入第二种目标蛋白酶进行第二次酶解，得到经过双酶解的榛仁蛋白水解液。本工艺以优化后榛仁分离蛋白提取工艺为基础，对榛仁蛋白进行酶解，提高了榛仁蛋白利用率。

技术领域

本发明属于抗氧化肽技术领域，具体涉及一种榛仁蛋白双酶解的工艺方法。

背景技术

我国盛产榛子，但对其开发利用方面仍处于初级的阶段。而以榛仁为原料可制备抗氧化肽，其能够在一定程度上清除体内自由基，起到延缓衰老，抵抗疲劳，预防各种疾病的作用。如今大多数抗氧化剂都是人工合成的，从天然植物中制备抗氧化剂有着易于吸收，安全无副作用的优点。同时，我国拥有极丰富的动植物蛋白资源，利用这一优势，开发天然抗氧化肽具有重要作用。目前对榛仁蛋白常用单酶解方法，为了高效制备多肽功能性产品，还需要进一步优化现有工艺。

发明内容

本发明针对上述现有技术的不足，提出一种榛仁蛋白双酶解的工艺方法。

本发明涉及一种榛仁蛋白双酶解的工艺方法，包括如下步骤：

步骤一、称取榛仁蛋白粉，加入蒸馏水配制成溶液，加热破坏其蛋白质结构，冷却后搅拌并将其调节至所需pH值；

步骤二、在上述溶液中加入目标蛋白酶开始酶解，榛仁蛋白粉溶液的质量百分比浓度为1-5％、pH 6.5-7.5，加入目标蛋白酶的质量百分比浓度为5-15％，在温度45-65℃下反应；在酶解反应完成后，对酶解液进行灭活，然后将其冷却到第二次酶解反应所需的温度；

步骤三、加入第二种目标蛋白酶进行第二次酶解，其质量百分比浓度为5-15％、pH8-9、温度55-65℃，得到经过双酶解的榛仁蛋白水解液。步骤一中，榛仁蛋白粉加入蒸馏水配制成溶液后，放入水浴锅中在95℃下加热15min，冷却后，置于磁力搅拌器上，用1mol/LNaOH溶液调节至所需pH值。

步骤二中，灭活操作具体操作为：在95℃温度下水浴15min使酶失去活性。

步骤二中，目标蛋白酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶或胰蛋白酶。

步骤三中，第二种目标蛋白酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶或胰蛋白酶。

步骤三中，所述榛仁蛋白水解液的水解度为39.67±0.3％。

本发明以优化后榛仁分离蛋白提取工艺为基础，对榛仁蛋白进行酶解，提高了榛仁蛋白利用率。利用蛋白酶催化特异性位点的不同，采用工业酶制剂对榛仁蛋白进行双酶复合水解，并用响应面法分析双酶复合作用对榛仁蛋白酶解效率的影响。结果表明，本发明的双酶水解程度要高于单酶解水解程度，达到39.67±0.3％。本发明提高了原料的利用率，进而提高榛子深加工企业的附加值。

具体实施方式

本发明涉及一种榛仁蛋白双酶解的工艺方法，包括如下步骤：

步骤一、称取榛仁蛋白粉，加入蒸馏水配制成溶液，放入水浴锅中在95℃下加热15min，冷却后，置于磁力搅拌器上，用1mol/L NaOH溶液调节至所需pH值；

步骤二、在上述溶液中加入目标蛋白酶开始酶解，榛仁蛋白粉溶液浓度值为2.2％、pH7.0、加入目标蛋白酶的酶量为11.5％、温度60℃；在酶解反应完成后，对酶解液进行灭活，在95℃温度下水浴15min使酶失去活性，然后将其冷却到第二次酶解反应所需的温度；

步骤三、加入第二种目标蛋白酶进行第二次酶解，加酶量12％、pH 8.5、温度55℃，得到经过双酶解的榛仁蛋白水解液。