[发明专利]一种含rhBMP-2带骨膜自体颅骨瓣的保存方法

说明书

本发明提供了一种含rhBMP‑2带骨膜自体颅骨瓣的保存方法，工艺简单、操作方便、能够最大限度保持颅骨瓣的活性和无菌的自体颅骨瓣体外低温保存方法，同时本发明添加了重组人骨形态发生蛋白质‑2(rhBMP‑2)提高了颅骨瓣愈合生长成功的概率，减少了颅骨瓣吸收情况的发生。

技术领域

本发明涉及医学和生物工程领域，具体涉及一种含rhBMP-2带骨膜自体颅骨瓣的保存方法。

背景技术

去骨瓣减压术是神经外科常用的救治技术，颅脑肿瘤、脑出血、颅脑外伤引发颅内高压，药物不能控制时需行去骨瓣减压术。较大范围的颅骨缺损患者因大气压使局部头皮下陷，可能会导致颅内压的不平衡、脑组织移位以及大脑半球血流量减少和脑脊液循环紊乱，从而引起一系列的临床表现，主要包括：头痛、眩晕、易激惹、癫痫、无其他原因可解释的不适感和各种精神障碍。颅骨成形术不但能够修复颅骨缺损、恢复患者的头颅外貌和保护功能，还能有效地恢复正常脑脊液动力学和大脑皮质血流灌注，有利于减少颅骨缺损相关的并发症，有助于患者的神经功能恢复。

目前使用颅骨成形术的材料有自体颅骨瓣和人工材料。自体颅骨保存移植，因为相对经济、组织反应性小且无需塑形、合乎生理解剖要求、无排斥反应等优点，仍然被许多神经外科医生所使用。

但是，自体颅骨保存的安全性和效果性仍存争议。自体颅骨保存可在生理状态下保存颅骨(如患者的腹部皮下脂肪层内)，但可能增加患者的痛苦，保存过程中颅骨可能出现吸收变薄、骨性能下降，导致术后出现骨板松动、塌陷等并发症。而深低温体外保存的颅骨瓣可保持骨细胞活性，冷冻骨瓣基质中的骨引导物未被灭活，修复后骨瓣可存活并与周围骨质融合。但此方法要求超低温保存所需得特殊设备，普通医院不易做到。同时，长时间深低温保存也存在颅骨瓣骨性能下降、增加手术感染率等风险。

尽管自体颅骨保存再植存在着感染和吸收等风险，但是《创伤性颅骨缺损成形术中国专家共识2016》中，专家推荐依然提倡自体颅骨保存回植为颅骨成型术的首选方案。

然而，自体颅骨瓣如何保存，因保存机构和承担手术神经外科医生不同，存在不同的方法。从而使保存下来的骨瓣品质不一，回植后感染和吸收的发生率较高，从而导致患者的二次手术，增加患者的痛苦和不必要的纠纷。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种含rhBMP-2带骨膜自体颅骨瓣的保存方法，工艺简单、操作方便、能够最大限度保持颅骨瓣的活性和无菌的自体颅骨瓣体外低温保存方法，同时本发明添加了重组人骨形态发生蛋白质-2(rhBMP-2)提高了颅骨瓣愈合生长成功的概率，减少了颅骨瓣吸收情况的发生。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种含rhBMP-2带骨膜自体颅骨瓣的保存方法，包括以下步骤：

1)将手术中取下的带骨膜颅骨瓣置入保存液C中，冷链运输至十万级的无菌操作间或超洁净无菌操作台，所述带骨膜颅骨瓣包括手术中咬下的颅骨碎块，所述保存液C为含有抗生素的甘油溶液或代血浆胶体溶液。

2)在无菌操作环境下，用等渗盐水清洗血迹，并剔除除骨膜之外的软组织，清理干净后用2％碘伏溶液浸泡30分钟，再用75％酒精清洗脱碘，最后再用等渗盐水冲洗干净并用无菌纱布擦干。

3)在无菌操作环境下，在颅骨内板上磨孔，到达颅骨外板停止，不穿破外板。

4)磨钻下来的颅骨碎与重组人骨形态发生蛋白质-2(rhBMP-2)及载体材料混合，回填至骨孔并等待固化。

5)固化完成后各钻孔处外口用骨腊涂抹封堵，操作完成后的骨瓣在无菌操作环境下用紫外线照射。

6)将照射完成后的骨瓣置入无菌保存盒A中，同时取一小块颅骨置入另一无菌保存盒B中，均倒入保存液D浸没并密封，所述保存液D为添加有抗生素和细胞防冻液的培养基溶液。