[发明专利]一种猪传染性胃肠炎病毒的RT-CPA检测引物和试剂盒有效
| 申请号： | 202010910323.X | 申请日： | 2020-09-02 |
| 公开（公告）号： | CN114196784B | 公开（公告）日： | 2023-07-25 |
| 发明（设计）人： | 陈伯祥;赵子惠;成伟伟;李元新;杨明 | 申请（专利权）人： | 甘肃省畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 吕纪涛 |
| 地址： | 744000 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种猪 传染性 胃肠炎 病毒 rt cpa 检测 引物 试剂盒 | ||
1.一种检测猪传染性胃肠炎病毒的试剂盒，其特征在于，包括RT-CPA检测引物、Reaction Buffer、Bst DNA聚合酶、AMV逆转录酶、dNTPs、Betaine和MgSO4，所述检测引物包括SD-CPF、SD-CPR、SD-F、SD-R、SD-DF和SD-DR；
所述SD-CPF的核苷酸序列如SEQ ID No .1所示；
所述SD-CPR的核苷酸序列如SEQ ID No .2所示；
所述SD-F的核苷酸序列如SEQ ID No .3所示；
所述SD-R的核苷酸序列如SEQ ID No .4所示；
所述SD-DF的核苷酸序列如SEQ ID No .5所示；
所述SD-DR的核苷酸序列如SEQ ID No .6所示；
所述RT-CPA检测引物使用时，扩增体系每20μL中包括：Reaction Buffer 2.0 μL，SD-CPF、SD-CPR各1.0 μM，SD-F、SD-R各0.5~1.0 μM，SD-DF、SD-DR各0.2~1.0 μM，MgSO4 0.6~1.8mM，dNTPs 0.6~2.0mM，Betaine 0.2~1.6M，Bst DNA聚合酶1~8.8U，AMV逆转录酶5U，模板RNA 1μL，ddH2O补足至20 μL。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括核酸检测试纸条。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述扩增体系每20 μL中包括：ReactionBuffer 2.0μL，SD-CPF、SD-CPR各1.0 μM，SD-F、SD-R各0.6 μM，SD-DF、SD-DR各0.4 μM，MgSO4 1.2mM，dNTPs 1.0mM，Betaine 1.6M，Bst DNA聚合酶8U，AMV逆转录酶5U，模板RNA 1μL，ddH2O补足至20 μL。
4.根据权利要求1或3所述的试剂盒，其特征在于，所述扩增的条件包括：在温度为57~65℃下反应15~90min，再在温度为85℃下灭活2min。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述扩增的条件包括：在温度为63℃下反应60min，再在温度为85℃下灭活2min。
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