[发明专利]一种针对高血压的药物靶点表达和纯化方法在审
申请号: | 202010911659.8 | 申请日: | 2020-09-02 |
公开(公告)号: | CN111961687A | 公开(公告)日: | 2020-11-20 |
发明(设计)人: | 张进;李健;万双燕 | 申请(专利权)人: | 深圳晶蛋生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/866 | 分类号: | C12N15/866;C12N15/12;C12P21/02 |
代理公司: | 新余市渝星知识产权代理事务所(普通合伙) 36124 | 代理人: | 廖平 |
地址: | 518118 广东省深圳市坪山区坪山*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 针对 高血压 药物 表达 纯化 方法 | ||
1.一种针对高血压的药物靶点表达和纯化方法,其特征在于,包括如下步骤:将人全长TRPM4基因片段克隆到pAntigen Mem载体,筛选阳性克隆;提取质粒,转化感受态DH10菌株,挑选阳性克隆;抽提杆粒,在杆状病毒表达系统中产生P3杆状病毒;将P3杆状病毒转导入HEK293S GnTI-细胞,诱导表达,收集纯化药物靶点。
2.根据权利要求1所述的针对高血压的药物靶点表达和纯化方法,其特征在于,所述人全长TRPM4基因片段编码第1-1214号氨基酸序列,其氨基酸序列如sequence No.1所示。
3.根据权利要求1所述的针对高血压的药物靶点表达和纯化方法,其特征在于,转导时,HEK293S GnTI-细胞密度为2.0-3.0×106细胞/ml,P3杆状病毒加入体积为细胞液的1/10。
4.根据权利要求1所述的针对高血压的药物靶点表达和纯化方法,其特征在于,细胞培养使用带挡板的烧瓶。
5.根据权利要求1所述的针对高血压的药物靶点表达和纯化方法,其特征在于,转导12-24h后,向细胞液中加入丁酸钠至终浓度为10mM。
6.根据权利要求1所述的针对高血压的药物靶点表达和纯化方法,其特征在于,转导12-24h后,细胞培养温度降至30℃。
7.人全长TRPM4基因片段编码的Sequence No.1的蛋白作为高血压的药物靶点的应用。
8.一种以人全长TRPM4基因片段编码的Sequence No.1的开发的治疗高血压的药物。
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