[发明专利]一种针对EGFP标签的纳米抗体及其应用有效
申请号: | 202010912634.X | 申请日: | 2020-09-02 |
公开(公告)号: | CN111995680B | 公开(公告)日: | 2022-02-11 |
发明(设计)人: | 付金衡;刘贝;王丹;黄云祥;钟引凤;周方月 | 申请(专利权)人: | 南昌大佳科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/22;C12N15/13;C12N15/70;C12N1/21;G01N33/68;G01N33/535;C12R1/19 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 袁红梅 |
地址: | 330096 江西省南昌市高*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 针对 egfp 标签 纳米 抗体 及其 应用 | ||
1.一种针对EGFP标签的纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。
2.一种核酸分子,其特征是编码权利要求1中所述的氨基酸序列,其核酸序列如SEQ IDNO.2所示。
3.一种包含权利要求2所述的核酸序列的载体。
4.一种包含权利要求3所述的载体的宿主细胞。
5.权利要求1所述的纳米抗体用于制备针对EGFP标签的检测抗体的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述检测抗体的制备方法包括以下步骤:
(1)HRP酶氧化:将HRP酶溶于HAc-NaAC溶液中,加入NaIO4溶液,4℃避光反应20min;加入乙二醇,4℃避光终止反应20min,离心取上清进行透析;
(2)HRP酶标记:加入待标记纳米抗体,4℃避光旋转混匀4h;加入CH3BHNa,室温反应2h;再加入乙醇胺封闭未结合位点,室温反应30min;
(3)加入终饱和度45%的硫酸铵粉末,4℃静置2 h;离心后弃上清用PBS重悬沉淀即得到HRP酶标记抗体。
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