[发明专利]一种玉龙蕨的组织培养方法

权利要求书

1.一种玉龙蕨的组织培养方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)玉龙蕨孢子萌发；取玉龙蕨孢子接种在萌发培养基中进行培养萌发，得到丛状的配子体；所述萌发培养基采用MS培养基、1/2MS培养基、1/4MS培养基或1/8MS培养基中的一种；

(2)诱导成苗；将所述配子体接种于诱导培养基中培养，得到孢子体；所述诱导培养基为1/2MS培养基；

(3)增殖；将所述孢子体接种于继代培养基中培养，得到丛生苗；所述继代培养基为1/2MS培养基；

(4)壮苗；将所述丛生苗接种于1/2MS培养基中进行培养，得到无根苗；

(5)移栽炼苗；将所述无根苗进行移栽、炼苗，即得；

所述MS培养基包括30g/L的蔗糖和4g/L的琼脂，pH值为5.8～6.2；所述1/2MS为在所述MS培养基的基础上大量元素和蔗糖减半；所述1/4MS为在所述MS培养基的基础上大量元素和蔗糖的用量为1/4；所述1/8MS为在所述MS培养基的基础上大量元素和蔗糖的用量为1/8。

2.根据权利要求1所述的一种玉龙蕨的组织培养方法，其特征在于：所述步骤(1)中玉龙蕨孢子在接种前还包括消毒的步骤；所述消毒采用质量浓度为0.1％的升汞溶液来进行，消毒的时间为4～7分钟。

3.根据权利要求2所述的一种玉龙蕨的组织培养方法，其特征在于：所述消毒的时间为5～6分钟。

4.根据权利要求1所述的一种玉龙蕨的组织培养方法，其特征在于：所述步骤(1)中培养萌发的温度为5℃～25℃，培养萌发的光照强度为1500～2000Lx，培养萌发的光照时间为8～14小时/天。

5.根据权利要求4所述的一种玉龙蕨的组织培养方法，其特征在于：所述培养萌发的温度为15℃～20℃。

6.根据权利要求1所述的一种玉龙蕨的组织培养方法，其特征在于：所述步骤(5)中在移栽前，无根苗先置于室内自然光条件下闭瓶炼苗；移栽时将无根苗基部的培养基清洗干净，并将基部以上40％～50％的叶片去除，多菌灵消毒；移栽时采用包括泥炭藓和河沙的基质来进行。

7.根据权利要求6所述的一种玉龙蕨的组织培养方法，其特征在于：所述闭瓶炼苗的时间为10～20天；所述多菌灵消毒采用质量百分比浓度为千分之一的多菌灵消毒后凉置15～30分钟；所述基质由泥炭藓和河沙制成，所述泥炭藓与河沙的质量比为2:1；所述移栽时的温度保持在20℃～30℃之间，湿度保持在80％以上。