[发明专利]核酸检测芯片装置、核酸检测芯片及其制备方法

权利要求书

1.一种核酸检测芯片的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)在修饰芯片模板上形成修饰PDMS块，并在修饰PDMS块表面形成修饰芯片槽；

(2)对玻璃片进行氨基化修饰，将修饰PDMS块上修饰芯片槽的一面覆于氨基化的玻璃片上，修饰芯片槽与玻璃片形成平行的多条修饰芯片通道；

(3)依次在修饰芯片通道内灌注链霉亲和素溶液并孵育、灌注生物素标记的gRNA并孵育、灌注Cas蛋白并孵育；

(4)去除玻璃片上的PMDS块，形成修饰芯片；

(5)在反应芯片模板上形成反应PDMS芯片，在阀芯片模板上形成阀PDMS芯片，所述反应PDMS层上形成平行的多条反应芯片槽，所述阀PDMS块是形成平行的多条阀芯片槽，多条阀芯片槽的端部连通；

(6)将反应PDMS芯片和阀PDMS块取下，将反应PDM芯片封接至阀PDMS块的阀芯片槽的一面，形成封装PDMS，将阀芯片槽封闭，形成阀芯片通道，反应芯片槽与阀芯片通道互相垂直；

(7)将封装PDMS与玻璃片封接，形成核酸检测芯片，所述反应芯片槽与玻璃片配合，形成反应芯片通道，所述反应芯片通道与修饰芯片通道垂直，所述阀芯片通道位于修饰芯片通道的间隔内。

2.根据权利要求1所述的核酸检测芯片的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，按比例取PDMS预聚物和交联剂，搅拌混合后灌注于修饰芯片模板上，厚度为3至10毫米，热烘固化冷却后形成修饰PDMS块，从修饰芯片模板上取下并在修饰PDMS块表面打孔，连通至修饰芯片槽。

3.根据权利要求2所述的核酸检测芯片的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，对玻璃片进行氨基化修饰的过程是：将玻璃片置于含有一定浓度APTES的甲苯溶液中浸泡进行氨基化修饰，完成后取出吹干。

4.根据权利要求3所述的核酸检测芯片的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中，所述链霉亲和素溶液孵育为4℃过夜孵育，完成后用PBS溶液清洗修饰芯片通道，灌注生物素标记的gRNA孵育和灌注LbCas12a孵育为37℃孵育30分钟。

5.根据权利要求4所述的核酸检测芯片的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)，在反应芯片模板上形成反应PDMS层的过程为：在所述反应芯片模板上对PDMS进行甩匀，热烘固化形成反应PDMS层；在阀芯片模板上形成阀PDMS块的过程为：在所述阀芯片模板上灌注PDMS，厚度为3-10毫米，热烘固化形成阀PDMS块，所述反应芯片通道和阀芯片通道是通过在反应芯片模板和阀芯片模板上设置凸起完成的。

6.根据权利要求4所述的核酸检测芯片的制备方法，其特征在于：所述修饰芯片通道的宽度为50-1000微米、反应芯片通道的宽度为50-1000微米、阀芯片通道的宽度为50-200微米。

7.根据权利要求4所述的核酸检测芯片的制备方法，其特征在于：所述修饰PDMS芯片、反应PDMS芯片和阀PDMS芯片的形成过程中，均热烘80℃半小时后冷却至室温形成。

8.根据权利要求4所述的核酸检测芯片的制备方法，其特征在于：所述核酸检测芯片上打孔，连通至反应芯片通道两端的孔，形成样品入口和样品出口，连通至阀芯片通道的孔，形成充气口。

9.一种应用权利要求1至8中任一项所述的核酸检测芯片的制备方法制备的核酸检测芯片。

10.一种核酸检测芯片装置，包括权利要求9所述的核酸检测芯片，其特征在于：还包括芯片支撑架，所述核酸检测芯片固定在芯片支撑架上，芯片支撑架上形成显微成像窗口，在所述芯片支撑架一侧设置样品储液池和气压控制口，所述样品储液池连接至反应芯片通道的样品入口，所述气压控制口连接至阀芯片通道的充气口。