[发明专利]移液器枪头、包含其的试剂盒及DNA提取方法在审
申请号: | 202010918060.7 | 申请日: | 2020-09-03 |
公开(公告)号: | CN111996108A | 公开(公告)日: | 2020-11-27 |
发明(设计)人: | 曹善柏;孙宏;楼峰 | 申请(专利权)人: | 北京橡鑫生物科技有限公司;天津橡鑫生物科技有限公司;北京橡鑫医学科技有限公司 |
主分类号: | C12M1/26 | 分类号: | C12M1/26;C12N15/10 |
代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人: | 路秀丽 |
地址: | 100080 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 移液器枪头 包含 试剂盒 dna 提取 方法 | ||
1.一种移液器枪头,包括枪头本体,其特征在于,所述枪头本体为一体成型的,所述枪头本体由下至上包括依次连接的第一管状区和第二管状区,且所述第一管状区和所述第二管状区的截面直径分别呈逐渐增大的趋势,且所述第二管状区的最小截面直径大于所述第一管状区的最大截面直径,所述第二管状区占所述枪头本体的1/2~3/4,所述第二管状区内设置有硅基质填充物。
2.根据权利要求1所述的移液器枪头,其特征在于,所述硅基质填充物设置在所述第二管状区的与所述第一管状区相连的一端。
3.根据权利要求1所述的移液器枪头,其特征在于,所述第二管状区中硅基质填充物的填充高度为1~5mm;
优选地,所述移液器枪头的容积为1mL。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的移液器枪头,其特征在于,所述硅基质填充物选自玻璃纤维、硅胶树脂或硅胶硝酸纤维。
5.一种核酸提取试剂盒,所述试剂盒包括移液器枪头,其特征在于,所述移液器枪头为权利要求1至4中任一项所述的移液器枪头。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括核酸提取试剂,
优选地,所述核酸提取试剂包括:裂解液、蛋白酶K、第一漂洗液、第二漂洗液及洗脱液中的一种或多种;
更优选地,所述裂解液包括80~150mM的Tris-HCL,40~70mM的EDTA,0.8~1.2M的NaCL,3%~10%的Triton-100,0.3%~1%的SDS;
更优选地,所述第一漂洗液包含80~150mM的Tris-HCL,40~70mM的EDTA,2~5M的异硫氰酸胍及50~70%的无水乙醇;
更优选地,所述第二漂洗液包含80~150mM的Tris-HCL,0.3~1M的NaCL及70~90%的无水乙醇;
更优选地,所述洗脱液包含8~15mM的Tris-HCL及0.5~2mM的EDTA。
7.一种DNA提取方法,其特征在于,所述提取方法包括采用权利要求5或6所述试剂盒进行提取。
8.根据权利要求7所述的提取方法,其特征在于,所述提取方法包括:
对样本依次采用蛋白酶K及裂解液进行裂解处理,得到裂解产物;
将所述裂解产物与无水乙醇混合,得到第一混合物;
采用移液器以及权利要求1至4中任一项所述的移液器枪头,对所述第一混合物进行反复吸打多次后,将全部液体打出所述移液器枪头;
将所述移液器枪头置入盛有第一漂洗液的第一离心管中,并利用所述移液器枪头吸取所述第一漂洗液反复吸打多次后,将全部液体打出所述移液器枪头;
将所述移液器枪头置入盛有第二漂洗液的第二离心管中,并利用所述移液器枪头吸取所述第二漂洗液反复吸打多次后,将全部液体打出所述移液器枪头;
将所述移液器枪头置入盛有洗脱液的第三离心管中,并利用所述移液器枪头吸取所述洗脱液反复吸打多次后,将全部液体打出所述移液器枪头,得到所述样本的DNA;
优选地,所述第一漂洗液包含80~150mM的Tris-HCL,40~70mM的EDTA,2~5M的异硫氰酸胍及50~70%的无水乙醇;
优选地,所述第二漂洗液包含80~150mM的Tris-HCL,0.3~1M的NaCL及70~90%的无水乙醇;
优选地,所述洗脱液包含8~15mM的Tris-HCL及0.5~2mM的EDTA。
9.根据权利要求8所述的提取方法,其特征在于,所述样本为细胞样本或血液样本。
10.根据权利要求8所述的提取方法,其特征在于,所述蛋白酶K与所述样本的体积比为8~10:1;
优选地,所述裂解液与所述样本的体积比为1~1.5:1;
优选地,所述第一漂洗液与所述样本的体积比为2~4:1;
优选地,所述第二漂洗液与所述样本的体积比为2~4:1;
优选地,所述洗脱液与所述样本的体积比为1~1.2:1。
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