[发明专利]固相萃取和电化学传感器联用检测木犀草素的方法

权利要求书

1.一种固相萃取和电化学传感器联用检测木犀草素的方法，其特征在于，使用固相萃取柱对待测样品中的木犀草素进行萃取，收集洗脱液；将ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶修饰的玻碳电极作为电化学传感器平台，对洗脱液中木犀草素进行检测；

所述ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶是向氧化石墨烯、壳聚糖和ZrOCl₂·8H₂O的分散液中添加水合肼后，采用水热合成法合成，合成产物经冷冻干燥后制得ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶；其具体制备方法如下：

(a)在氧化石墨烯悬浮液中，依次加入壳聚糖和ZrOCl₂·8H₂O，搅拌分散；

(b)在分散后的(a)中加入水合肼，将混合溶液立即转移到反应釜中，水热合成反应后，冷却，离心；

(c)将(b)得到的产物冷冻干燥得到ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶；

所述固相萃取所用的萃取材料为ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶修饰硅胶；所述ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶修饰硅胶是先向氨丙基修饰硅胶与氧化石墨烯分散液中加入N,N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亚胺搅拌均匀，再加入壳聚糖和ZrOCl₂·8H₂O反应，合成产物经冷冻干燥后制得ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶修饰硅胶；其具体制备方法如下：

①将氨丙基修饰硅胶加入氧化石墨烯悬浮液中，加入N,N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲基丙基)-3-乙基碳二亚胺，搅拌均匀；

②在①中加入壳聚糖和ZrOCl₂·8H₂O，搅拌反应后，离心；

③将②离心得到的产物进行冷冻干燥，得到ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶修饰的硅胶。

2.根据权利要求1所述固相萃取和电化学传感器联用检测木犀草素的方法，其特征在于，所述ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶修饰的玻碳电极由以下方法制备而成：

(1)裸玻碳电极分别用不同粒径的氧化铝粉末打磨至表面呈镜面，然后分别在硝酸溶液、乙醇和水中超声处理；

(2)将ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶加入到Nafion溶液中，超声，分散均匀；

(3)用移液枪吸取(2)中的分散溶液，滴涂到(1)处理干净的玻碳电极表面，室温干燥后即得。

3.根据权利要求1所述固相萃取和电化学传感器联用检测木犀草素的方法，其特征在于，所述固相萃取柱为中空柱管，柱管两端分别设置有上筛板和下筛板，上下筛板之间填充萃取材料。

4.根据权利要求1～3任一项所述固相萃取和电化学传感器联用检测木犀草素的方法，其特征在于，步骤如下：

Ⅰ、将待测样品溶液通过固相萃取柱，使用洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液；

Ⅱ、将步骤Ⅰ得到的洗脱液放入PBS缓冲液中，将ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶修饰的玻碳电极置于含有洗脱液的PBS缓冲溶液中，静置吸附1-15min；

Ⅲ、将步骤Ⅱ中静置吸附后的ZrO₂纳米颗粒和壳聚糖掺杂石墨烯气凝胶修饰的玻碳电极作为工作电极与参比电极和对电极置于PBS缓冲液中，连通三电极系统，采用循环伏安法和差分脉冲伏安法进行电化学检测，扫描速度为25-300mV s^-1。

5.根据权利要求4所述固相萃取和电化学传感器联用检测木犀草素的方法，其特征在于，所述步骤Ⅰ中的条件为：上样体积30mL，上样速率1.5mLmin^-1，洗脱剂体积0.5mL，洗脱速率0.5mLmin^-1。