[发明专利]新型冠状病毒中和性抗体滴度检测ELISA试剂盒有效
申请号: | 202010919164.X | 申请日: | 2020-09-04 |
公开(公告)号: | CN111781354B | 公开(公告)日: | 2020-12-01 |
发明(设计)人: | 葛平菊;苗景赟;张兴琳 | 申请(专利权)人: | 北京百普赛斯生物科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/543;G01N33/535 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 黄爽 |
地址: | 100176 北京市大兴*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新型 冠状病毒 中和 抗体 检测 elisa 试剂盒 | ||
1.新型冠状病毒中和性抗体滴度检测ELISA试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:包被有链霉亲和素和生物素标记的人ACE2蛋白的酶标板、辣根过氧化酶标记的新型冠状病毒RBD蛋白、新型冠状病毒中和性抗体阳性对照、包被液、洗涤液、稀释液、封闭液、显色液和终止液;
酶标板上包被的链霉亲和素的浓度为5ug/mL,生物素标记的人ACE2蛋白的浓度为2ug/mL,链霉亲和素与生物素标记的人ACE2蛋白的摩尔比为1:4;
酶标板的包被方法如下:酶标板先经过链霉亲和素溶液包被过夜,用洗涤液洗板后,加入生物素标记的人ACE2蛋白,用封闭液进行封闭并洗涤;
所述辣根过氧化酶标记的新型冠状病毒RBD蛋白中,辣根过氧化酶与RBD蛋白的摩尔比为4:1;
辣根过氧化酶标记的新型冠状病毒RBD蛋白的使用浓度为50ng/mL;辣根过氧化酶标记的新型冠状病毒RBD蛋白在试剂盒中为冻干粉形式,冻干粉中含有10%海藻糖;
所述包被液为碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液,具体成分为:15 mM Na2CO3,35 mM NaHCO3,pH9.6;
所述洗涤液为:20mM Tris,150mM NaCl,0.5% v/v Tween-20,pH7.4;
所述稀释液为含0.5%牛血清白蛋白的洗涤液;
所述显色液为:50 mM Na2HPO4·12H2O +25 mM柠檬酸+40 mg/mL TMB+3% H2O2,pH5.5。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述终止液为1 M硫酸溶液。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述酶标板为96孔板。
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