[发明专利]一种适用于TSH粉末状国际标准物质浓度准确配制的方法

说明书

本发明公开了一种适用于TSH粉末状国际标准物质浓度准确配制的方法。所述方法包括如下步骤：切割盛放粉末状的TSH国际标准物质的安瓿瓶的凹陷部位；将离心管竖直放置并使管口位于安剖瓶的切割部位，打开安剖瓶，使可能外洒的粉末状标准物质落入离心管内；采用稀释液多次洗涤被分隔成两部分的安剖瓶的内壁，并将所有液体移至离心管中；将离心管中的液体用吸管转移至小管中，并称取其最终质量为M1，作为TSH国际标准物质的原液；测定标准物质的原液的密度，则得原液中TSH的浓度，记为C1；采用TSH 0值混合人血清稀释标准物质的原液，得到不同浓度的标准物质的标准系列溶液。本发明方法为各体外诊断试剂厂商进行量值溯源提供了方法选择，也为正确度验证样本的配制提供参考。

技术领域

本发明涉及标准物质使用领域，具体涉及一种将TSH国际标准物质配制成不同浓度的方法。

背景技术

促甲状腺激素(Thyroid Stimulating Hormone,TSH)是腺垂体嗜碱性细胞分泌的一种糖蛋白类激素，由211个氨基酸组成，其分子结构由非共价的α、β亚基异二聚体组成，其中该激素发挥生物和免疫功能特异性的是β亚基，α亚基与黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)及人绒毛膜促性腺激素(HCG)的α亚基基本相同。TSH能促进T3(三碘甲腺原氨酸)及T4(甲状腺素)的分泌，同时又受T3及T4的负反馈，是判断甲状腺功能最敏感的指标，在甲状腺疾病治疗过程中，应密切监测该指标的水平。

目前TSH的免疫分析主要为放射免疫分析法(Radioimmunoassay,RIA)，免疫放射分析法(immunoradiometric assay,IRMA)，化学发光免疫分析法 (ChemiluminescenceImmunoassay,CLIA)，电化学发光免疫分析法 (Electrochemiluminescence Immunoassay,ECLIA)，时间分辨荧光免疫分析法 (Time-resolved Fluoroimmunoassay,TrFIA)和化学发光酶免疫分析法 (Chemiluminescence Enzyme Immunoassay,CLEIA)等。TSH各厂商检测结果差异较大，有些低浓度的TSH检测值，贝克曼Access 2高于西门子Immulite 2000约20倍。最近有研究表明，TSH在正常浓度时，方法间差异较小，而在异常浓度时差异较大。国内马东红等人对6种TSH检测方法对比研究发现方法间存在不同程度的差异，并且发现放免法和免疫放射法与自动化检测系统的相关性差(r为0.38-0.41)。造成系统间结果差异的原因有很多，如各厂商使用不同的抗体不同，检测人员和仪器间本身的差异等。但是各厂商在校准品的赋值过程中能否正确使用通用的国际标准物质(WHO NIBSC 81/565)并将其值进行准确的传递是重要的影响因素。

鉴于WHO NIBSC 81/565是高浓度TSH冻干粉末，各厂商在利用该标准物质溯源时必须进行一系列的多点稀释。早在2008年，Blirup-Jensen等人就提出了稀释法对蛋白类检验项目赋值的研究方案。他们利用CRM 470，将其值准确的转移到生产厂商的一级校准物和工作校准物或质控物，并以实例做了演示。第一类是血清基质之间的直接靶值转移，其方案是基于参考物质和目标物质6点稀释的多个测量。转移方案需要每天做重复测量，持续几天。复融和稀释都通过称重来控制，以减少转移中的不确定度。在开放系统中，可以使用参考物质作为校准物，目标物质作为样品。两种物质(无论有无基质效应)的浓度比值通过单一回归图直接估计。如果没有基质效应，回归线将通过零点，其斜率等于两种物质浓度的比值。在封闭系统中，必须使用专用的商品化的校准物，参考物质和目标物质作为样品来分析。