[发明专利]用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂及其应用

说明书

本发明提供用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂及其应用，涉及到疫苗制造领域。该复合免疫增强剂，含有羧甲基茯苓多糖、透明质酸和α‑GC。本发明还提供所述复合免疫增强剂在猪伪狂犬灭活疫苗中的应用。本发明复合免疫增强剂，能够提高伪狂犬灭活疫苗免疫后的抗体水平，显著提高对近年流行的伪狂犬变异毒株的保护力。

技术领域

本发明涉及到疫苗制造领域，具体涉及用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂及其应用。

背景技术

伪狂犬病毒(Pseudorabies virus，PRV)属于疱疹I型双股DNA病毒，其感染症状主要体现在神经、生殖系统两个方面。仔猪最容易遭受感染感染且表现最为敏感，容易发生中枢神经症状，伪狂犬病的死亡率可高达到100％。起初，仔猪食欲下降，精神沉郁，浑身乏力，24h内后表现出中枢神经症状，如共济失调、颤抖、流涎等，仔猪会出现后肢瘫痪，转圈、划水动作，仔猪一般在发病后36h内发生死亡。怀孕母猪感染PRV导致死胎或者流产，怀孕四个月到九个月的母猪感染PRV会发生流产，产生死胎和弱仔；怀孕三个月的母猪感染以后会在子宫内把胎儿吸收。伪狂犬病毒在宿主外周神经系统中建立潜在感染，当潜在病毒被重新激活或者受到压力刺激就会产生感染性病毒。在刺激因素的作用下潜伏感染的动物会激活并且释放病毒，刺激因素有饲养条件差，分群转栏，车辆运输，共感染其他病原等。

疫苗接种是该病常规的预防方法。伪狂犬灭活疫苗是将伪狂犬病毒在细胞上进行增殖，将病毒灭活后制成灭活疫苗。由于将病毒灭活就不存在潜伏感染和毒力返强的可能，因此安全性很高。但是，由于伪狂犬灭活疫苗的免疫原性差，灭活疫苗不能在体内复制，无法向宿主免疫系统递呈内源性蛋白抗原，也不可以诱导细胞毒性T细胞反应，因此免疫后抗体阳性率低、抗体水平低。

现有技术中，缺乏能够高效提升伪狂犬灭活疫苗免疫后抗体水平的免疫增强剂。

发明内容

本发明的目的是提供用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂，能够提高伪狂犬灭活疫苗免疫后的抗体水平，显著提高对近年流行的伪狂犬变异毒株的保护力。

本发明的目的采用如下技术方案实现：

用于猪伪狂犬灭活疫苗的复合免疫增强剂，含有羧甲基茯苓多糖、透明质酸和α-GC。

在本发明中，该复合免疫增强剂中羧甲基茯苓多糖、透明质酸和α-GC的浓度比为1:3-10:1-40。

本发明还提供所述复合免疫增强剂在猪伪狂犬灭活疫苗中的应用。

本发明还提供含有所述复合免疫增强剂的猪伪狂犬灭活疫苗，所述猪伪狂犬灭活疫苗中含有1～20mg/mL羧甲基茯苓多糖、1～6μg/mL透明质酸和0.1～1000μg/mL的α-GC。

本发明还提供所述猪伪狂犬灭活疫苗的制备方法，包括如下步骤：

(1)将羧甲基壳聚糖、透明质酸和α-GC溶解于猪伪狂犬灭活病毒液中，得到水相溶液；

(2)将所述水相溶液与油相溶液混合、乳化，得到灭活疫苗。

在本发明中，步骤(2)中所述油相为ISA 206佐剂。

在本发明中，所述水相与油相的体积比为1:0.5-1.5。

在本发明中，所述水相溶液中羧甲基茯苓多糖、透明质酸和α-GC的浓度分别为2～40mg/mL、2～12μg/mL和0.2～2000μg/mL。

本发明中复合免疫增强剂也可以用于猪圆环病毒、猪细小病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪口蹄疫病毒、猪蓝耳病毒等灭活病毒疫苗，具有一定的提高免疫效果的作用。

本发明相对于现有技术，具有以下优点：