[发明专利]人乳头瘤病毒16型表位嵌合L1的重组载体、重组蛋白、病毒样颗粒及其制备和应用在审
| 申请号： | 202010920896.0 | 申请日： | 2020-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN111944834A | 公开（公告）日： | 2020-11-17 |
| 发明（设计）人： | 刘微;孙美艳;郭健;张磊;许会静;王皓 | 申请（专利权）人： | 吉林医药学院 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/70;C07K19/00;A61K39/12;A61P31/20;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 刘小娇 |
| 地址： | 132013*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 乳头 病毒 16 型表位 嵌合 l1 重组 载体 蛋白 颗粒 及其 制备 应用 | ||
1.含有人乳头瘤病毒16型E749-57表位嵌合L1 DNA片段，其特征在于，所述DNA片段的序列如SEQ ID NO.1所示。
2.含有人乳头瘤病毒16型E749-57表位嵌合L1 DNA片段的重组载体，其特征在于，包括载体和基因片段HPV16 L1-E749-57；
其中，所述基因片段HPV16 L1-E749-57含有如SEQ ID NO.1所示的碱基序列组成的DNA片段。
3.如权利要求2所述的含有人乳头瘤病毒16型E749-57表位嵌合L1 DNA片段的重组载体，其特征在于，所述载体为质粒pET28a。
4.含有人乳头瘤病毒16型E749-57表位嵌合L1 DNA片段的重组载体的构建方法，其特征在于，包括：
以pGEM-Teasy-16L1-E749-57为模板，利用SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的引物序列通过PCR扩增得到如SEQ ID NO.1所示的碱基序列组成的DNA片段，并将其构建到pET-28a质粒上以得到重组质粒pET28a-16L1-E749-57。
5.含有人乳头瘤病毒16型E749-57表位嵌合L1的重组蛋白，其特征在于，包括含有由SEQID NO.4所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
6.含有人乳头瘤病毒16型E749-57表位嵌合L1的重组蛋白的构建方法，其特征在于，使用如权利要求1或2所述的含有人乳头瘤病毒16型E749-57表位嵌合L1 DNA片段的重组载体，包括如下过程：
将所述重组质粒pET28a-16L1-E749-57转入大肠杆菌BL21中，培养后收集菌体并纯化得到重组蛋白；
其中，所述重组蛋白含有由SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
7.含有人乳头瘤病毒16型E749-57表位嵌合L1的病毒样颗粒，其特征在于，包括含有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
8.含有人乳头瘤病毒16型E749-57表位嵌合L1的病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，使用如权利要求5所述的重组蛋白，包括：
向所述重组蛋白中加入还原剂作用后，在组装液中透析后得到自组装的病毒样颗粒。
9.使用如权利要求7所述的含有人乳头瘤病毒16型E749-57表位嵌合L1的病毒样颗粒在制备人乳头瘤病毒疫苗的应用。
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