[发明专利]一种分离测定瑞博西尼及杂质的方法

权利要求书

1.一种分离测定瑞博西尼及杂质的方法，其特征在于，包括以下步骤，

1)制备试样溶液

取瑞博西尼或含有瑞博西尼的制剂，加稀释剂溶解，得到浓度为0.1-10mg/ml的试样溶液，瑞博西尼或含有瑞博西尼的制剂中含有包括如下结构式的杂质(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)，

2)制备对照溶液

取步骤1)得到的试样溶液，加稀释剂稀释50-1000倍，得到对照溶液；

3)分别向高效液相色谱仪进样等体积的步骤1)试样溶液、步骤2)对照溶液，进样量为5μl-100μl，利用210nm至290nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中杂质的分离测定，

其中，所述高效液相色谱仪色谱柱的固定相填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，设置流动相的流速为0.8-1.2ml/min，所述流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为浓度是0.0001-1.0mol/L的缓冲溶液，所述缓冲溶液为磷酸和/或磷酸盐溶液，流动相B为乙腈，流动相采用梯度洗脱方式进入色谱柱，0分钟至10分钟，流动相A的体积百分数为90％，流动相B的体积百分数为10％，10分钟至30分钟，流动相A的体积百分数线性减少至30％，流动相B的体积百分数线性增加至70％；30分钟至40分钟，流动相A的体积百分数为30％，流动相B的体积百分数为70％；40分钟至41分钟，流动相A的体积百分数线性增加至90％，流动相B的体积百分数线性减少至10％；41分钟至50分钟，流动相A的体积百分数为90％，流动相B的体积百分数为10％。

2.根据权利要求1所述的分离测定瑞博西尼及杂质的方法，其特征在于，步骤1)、步骤2)所述稀释剂，为乙腈和0.01mol/L磷酸盐缓冲液的混合物，乙腈和0.01mol/L磷酸盐缓冲液的体积比为85-95：5-15。

3.根据权利要求2所述的分离测定瑞博西尼及杂质的方法，其特征在于，乙腈和0.01mol/L磷酸盐缓冲液的体积比为90：10。

4.根据权利要求1所述的分离测定瑞博西尼及杂质的方法，其特征在于，步骤3)中流动相A的浓度为0.001-0.01mol/L。

5.根据权利要求1或4所述的分离测定瑞博西尼及杂质的方法，其特征在于，步骤3)所述磷酸盐为磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二胺中的任一种或几种，缓冲溶液的pH值为2.0-3.5。

6.根据权利要求1所述的分离测定瑞博西尼及杂质的方法，其特征在于，步骤3)进样量为10μl，利用276nm波长检测，色谱柱的柱温为20-40℃。

7.根据权利要求6所述的分离测定瑞博西尼及杂质的方法，其特征在于，色谱柱的柱温为30℃。