[发明专利]一种分离测定瑞博西尼及杂质的方法

说明书

一种分离测定瑞博西尼及杂质的方法，包括以下步骤，1)取瑞博西尼加稀释剂溶解，得到浓度为0.1‑10mg/ml的试样溶液；2)取步骤1)的试样溶液加稀释剂稀释50‑1000倍，得到对照溶液；3)采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，设置流动相的流速为0.8‑1.2ml/min，流动相由浓度是0.0001‑1.0mol/L的缓冲溶液和乙腈组成，采用梯度洗脱方式进入色谱柱；4)分别向高效液相色谱仪进样等体积的步骤1)试样溶液、步骤2)对照溶液，进样量为5μl‑100μl，利用210nm至290nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中杂质的分离测定。本发明操作简单、方便，可有效实现瑞博西尼及杂质、杂质与杂质之间的分离和测定，从而实现控制瑞博西尼及其产品的质量的目的。

技术领域

本发明涉及分析化学领域，特别涉及一种分离测定瑞博西尼及杂质的方法。

背景技术

瑞博西尼为瑞士诺华公司研发的一种新型的、具有选择性抑制CDK4/6，恢复细胞周期控制，阻断肿瘤细胞增殖，从而达到治疗乳腺癌的药物。2017年3月，获得美国FDA批准上市，其商品名为Kisqali，化学名称为7-环戊基-N,N-二甲基-2-[[5-(1-哌嗪基)-2-吡啶基]氨基]-7H-吡咯并[2,3-D]嘧啶-6-甲酰胺丁二酸盐，其化学结构式如式(a)所示。

在合成该化合物的过程中，有几步重要的中间体和未知杂质可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，这些已知中间体和未知杂质以及产生的降解产物即为药物质量控制中通常所说的有关物质(即杂质)。对于瑞博西尼的合成主要控制的已知杂质有十四个，分别是：杂质Z1、杂质Z2、杂质Z3、杂质Z4、杂质Z5、杂质Z6、杂质Z7、杂质Z8、杂质Z9、杂质Z10、杂质Z11、杂质Z12、杂质Z13、杂质Z14，其结构式分别如式(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)、(o)。

可见，瑞博西尼的杂质较多，且结构类似，给分离带来难度。另外，各杂质的极性各不相同，在满足瑞博西尼与各个杂质分离的前提下，还要满足杂质与杂质之间的分离，增大了检测难度。采用常规的检测手段方法难以实现瑞博西尼与杂质以及杂质与杂质之间的有效分离，不利于瑞博西尼的质量控制。

本品目前国内未上市，无相关杂质权威报道及检测方法。为了准确地控制瑞博西尼产品的质量，有必要研究一种能简单、快速、准确地分离检测出瑞博西尼有关物质的方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种分离测定瑞博西尼及杂质的方法，其操作简单、方便，可有效实现瑞博西尼及杂质、杂质与杂质之间的分离和测定，从而实现控制瑞博西尼及其产品的质量的目的。

本发明的技术方案是：一种分离测定瑞博西尼及杂质的方法，包括以下步骤，

1)制备试样溶液

取瑞博西尼或含有瑞博西尼的制剂，加稀释剂溶解，得到浓度为0.1-10mg/ml的试样溶液；

2)制备对照溶液

取步骤1)得到的试样溶液，加稀释剂稀释50-1000倍，得到对照溶液；

3)分别向高效液相色谱仪进样等体积的步骤1)试样溶液、步骤2)对照溶液，进样量为5μl-100μl，利用210nm至290nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中杂质的分离测定，