[发明专利]一对含双氮生物碱对映体及其制备和应用

权利要求书

1.一株草酸青霉菌的应用，其特征在于：所述草酸青霉菌在制备含双氮生物碱对映体中的应用；

所述草酸青霉（Penicillium oxalicum）13-37于2020年6月9日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏编号为CGMCC No.19913，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；

所述含双氮生物碱对映体为R或S，结构式如式（I）所示

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2.一种含双氮生物碱对映体，其特征在于：含双氮生物碱对映体为R或S，结构式如式（I）所示

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3.一种权利要求2所述的含双氮生物碱对映体的制备方法，其特征在于：将深海沉积物来源的真菌草酸青霉（Penicillium oxalicum）13-37接种于真菌培养基中发酵培养，发酵产物经纯化后，即为式（I）所示的含双氮生物碱对映体；所述的草酸青霉（Penicillium oxalicum）13-37于2020年6月9日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏编号为CGMCC No.19913；

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4.按权利要求3所述的含双氮生物碱对映体的制备方法，其特征在于具体制备步骤：

1）将草酸青霉（Penicillium oxalicum）13-37接种于真菌培养基中，发酵10-60天，之后经有机溶剂提取并浓缩，得到其粗提物；

2）取步骤1）中获取的粗提物进行硅胶柱层析，用有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液经薄层层析检测；

3）收集步骤2）中洗脱组分再依次经反相硅胶柱层析、凝胶柱层析、高效液相色谱反相柱和高效液相色谱手性柱，即得如式（I）所示的含双氮生物碱对映体。

5.按权利要求4所述的含双氮生物碱对映体的制备方法，其特征在于：步骤1）中真菌培养基为大米固体培养基、菊芋葡萄糖液体培养基或马铃薯葡萄糖液体培养基；

有机溶剂提取液为乙酸乙酯、石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇中一种或几种。

6.按权利要求5所述的含双氮生物碱对映体的制备方法，其特征在于：步骤２）中洗脱液为体积比50-0:1的石油醚-乙酸乙酯、石油醚-乙醇、石油醚-丙醇、石油醚-异丙醇、二氯甲烷-乙酸乙酯、二氯甲烷-甲醇、二氯甲烷-乙醇、二氯甲烷-丙醇、二氯甲烷-异丙醇中的一组或几组。

7.按权利要求5所述的含双氮生物碱对映体的制备方法，其特征在于：步骤３）所述反相硅胶柱层析洗脱液为体积比5-0:3的水-甲醇或水-乙醇；凝胶柱层析洗脱液为体积比2-0:1的二氯甲烷-甲醇或二氯甲烷-乙醇；高效液相色谱反相柱流动相为体积比为10-0:3的水-甲醇或水-乙腈；高效液相色谱手性柱流动相为体积比10-0:3的正己烷-乙醇或正己烷-异丙醇。

8.一种权利要求3所述的含双氮生物碱对映体的应用，其特征在于：所述式（I）所示的含双氮生物碱对映在制备抑制肿瘤细胞增殖方面药物中的应用；

所述肿瘤细胞为肿瘤细胞A549。

9.按权利要求3所述的含双氮生物碱对映体的应用，其特征在于：所述式（I）所示的含双氮生物碱对映在制备抑菌剂中的应用；

所述菌为柠檬假单胞菌、金黄色葡萄球菌、哈氏弧菌、灿烂弧菌或副溶血弧菌。