[发明专利]一对含双氮生物碱对映体及其制备和应用

说明书

本发明涉及微生物领域，具体地说是一对深海沉积物真菌来源的含双氮生物碱对映体的制备方法及其应用。其具体结构式如（I）所示，制备方法为将深海沉积物来源的真菌草酸青霉（Penicillium oxalicum）13‑37接种于真菌培养基中发酵培养，发酵产物经过分离纯化，即为式（I）所示的一对含双氮生物碱对映体（R）和（S）。本发明获得的一对含双氮生物碱对映体对肿瘤细胞具有抑制作用，同时该化合物还具有抑菌的活性。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体地说是一对深海沉积物真菌来源的含双氮生物碱对映体的制备方法及其应用。

背景技术

恶性肿瘤一直对人类的健康具有严重的威胁，虽然临床被批准了很多药物用于肿瘤细胞治疗，但相当一部分药物具有严重的副作用。因此，越来越多科学家把目光投入到具有独特环境的海洋中，特别是低温低氧黑暗的深海，以期望发现具有良好的抑制肿瘤细胞效果且副作用较少的化合物。其中，生物碱类化合物作为一种具有极高生物活性的天然产物,在抑制肿瘤细胞增殖和抑菌方面的潜力也逐渐显现出来。

深海沉积物来源真菌次级代谢产物具有针对性强、活性显著且结构新颖的优点，能够为科学家在制备抑菌剂及新药结构修饰和合成方面提供新的思路。

发明内容

本发明的目的是提供一对含双氮生物碱对映体及其制备和应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一株草酸青霉菌的应用，所述菌株在作为抑制肿瘤细胞增殖的药物中的应用。

一株草酸青霉菌的应用，所述菌株在制备含双氮生物碱对映体中的应用。

一种含双氮生物碱对映体，含双氮生物碱对映体为R或S，结构式如式（I）所示，即手性位点为12.

（I）。

一种含双氮生物碱对映体的制备方法，将深海沉积物来源的真菌草酸青霉（Penicillium oxalicum）13-37接种于真菌培养基中发酵培养，发酵产物经纯化后，即为式（I）所示的含双氮生物碱对映体；所述的草酸青霉（Penicillium oxalicum）13-37于2020年6月9日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏编号为CGMCCNo.19913；

（I）。

具体制备步骤：

1）将草酸青霉（Penicillium oxalicum）13-37接种于真菌培养基中，发酵10-60天，之后经有机溶剂提取并浓缩，得到其粗提物；

2）取步骤1）中获取的粗提物进行硅胶柱层析，用有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液经薄层层析检测；

3）收集步骤2）中洗脱组分再依次经反相硅胶柱层析、凝胶柱层析、高效液相色谱反相柱和高效液相色谱手性柱，即得如式（I）所示对一对含双氮生物碱对映体。

步骤1）中真菌培养基为大米固体培养基、菊芋葡萄糖液体培养基或马铃薯葡萄糖液体培养基；

有机溶剂提取液为乙酸乙酯、石油醚、正己烷、环己烷、二氯甲烷、甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇中一种或几种；其中几种物质以任意比例混合。