[发明专利]一种替代中和效力测定的ELISA方法及其应用有效
申请号: | 202010937821.3 | 申请日: | 2020-09-08 |
公开(公告)号: | CN112048006B | 公开(公告)日: | 2021-04-27 |
发明(设计)人: | 秦爱建;张昱晗;武奇;钱琨;邵红霞;叶建强 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C07K14/165 | 分类号: | C07K14/165;C07K16/10;G01N33/68;G01N33/569;G01N33/58;G01N33/543 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 王艳 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 替代 中和 效力 测定 elisa 方法 及其 应用 | ||
1.一种非诊断目的的替代中和效力测定的ELISA方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将IBV特异性中和表位抗原多肽包被酶标板,包被后用兔血清封闭;所述IBV特异性中和表位抗原多肽为环状多肽,所述环状多肽的氨基酸序列为CSCPYVSYGRFCIQPDGSIKQC,
2)洗涤多次后,加入鸡血清共同孵育;
3)再次洗涤多次,再与山羊抗鸡IgG酶标抗体共同孵育, 经多次洗涤后,用TMB底物显色;
4)最后用0.1%SDS终止反应,用酶联免疫吸附分析仪检测650nm的吸光度,从而检测出个体中IBV的中和抗体水平。
2.IBV特异性中和表位抗原多肽在制备IBV检测试剂盒方面的应用,所述IBV特异性中和表位抗原多肽为环状多肽,所述环状多肽的氨基酸序列为CSCPYVSYGRFCIQPDGSIKQC。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述检测试剂盒包括以下组分:包被权利要求1所述的IBV特异性中和表位抗原多肽的酶标板、酶标抗体、底物溶液、终止液、洗涤液、阴性对照和阳性对照。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述酶标抗体为山羊抗鸡IgG酶标抗体。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述底物溶液为TMB显色溶液。
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