[发明专利]治疗产品中聚乙烯亚胺含量的检测方法

说明书

本发明涉及治疗产品中聚乙烯亚胺含量的检测方法，治疗产品中聚乙烯亚胺含量的检测方法包括以下步骤：获取聚乙烯亚胺对照品；采用高效液相色谱‑电雾式检测器联用技术检测对照品；获取待测品；采用高效液相色谱‑电雾式检测器联用技术检测待测品；比对对照品和待测品的检测结果，获得待测品中聚乙烯亚胺的含量。上述方法能够准确检测治疗产品中聚乙烯亚胺含量。

技术领域

本发明涉及仪器分析技术领域，特别涉及治疗产品中聚乙烯亚胺含量的检测方法。

背景技术

近年来，基因治疗作为一种新型疗法快速发展，数款基因治疗产品如Luxturna、Yescarta、T-vec、Strimvelis等陆续推上市场。基因治疗产品的治疗效果很大程度上依赖于基因转染系统，即通过使用特定的转染试剂将带有目的基因的载体运送至细胞内。

目前，应用最广泛的转染试剂包括阳离子脂质体和阳离子聚合物。其中，阳离子脂质体在体外基因转染中具有很高的效率，但在体内，它会被迅速清除，并在肺组织内积累，诱发强烈的抗炎反应，且具有毒性，因此应用受到限制。而阳离子聚合物聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)为人工合成的聚合物，是一种含有极高密度正电荷的有机大分子阳离子聚合物，其可以将DNA凝聚成紧密的颗粒，进入细胞，并将DNA吸收到细胞核中，是目前较为有效的聚阳离子型基因载体，被广泛应用于DNA载体的设计。然而，随着PEI用量的增大，其细胞毒性也随之升高，故治疗产品中PEI残留对临床用药安全性具有很大影响，在产品放行检测时检测PEI残留量(即PEI含量)具有较大意义。目前并没有PEI含量检测方法，因此，急需研发一种能够准确检测治疗产品中聚乙烯亚胺含量的检测方法。

发明内容

基于此，有必要提供一种能够准确检测治疗产品中聚乙烯亚胺含量的检测方法。

高效液相色谱-电雾式检测器联用技术在检测治疗产品中聚乙烯亚胺含量中的应用。

在其中一实施例中，所述治疗产品为含有聚乙烯亚胺载体的基因治疗产品。

在其中一实施例中，所述高效液相色谱-电雾式检测器联用技术中的高效液相色谱为尺寸排阻高效液相色谱。

一种治疗产品中聚乙烯亚胺含量的检测方法，包括以下步骤：

获取聚乙烯亚胺对照品；

采用高效液相色谱-电雾式检测器联用技术检测所述对照品；

获取待测品；

采用高效液相色谱-电雾式检测器联用技术检测所述待测品；

比对所述对照品和所述待测品的检测结果，获得所述待测品中聚乙烯亚胺的含量。

在其中一实施例中，比对所述对照品和所述待测品的检测结果的步骤中，根据以下公式获得聚乙烯亚胺的含量：

其中，C表示聚乙烯亚胺的含量(ng/mL)；

m1表示所述对照品的进样量(ng)；

A1表示所述对照品的峰面积；

A2表示所述待测品的峰面积；

V2表示所述待测品的进样体积(mL)。

在其中一实施例中，所述治疗产品为含有聚乙烯亚胺载体的基因治疗产品，所述高效液相色谱为尺寸排阻高效液相色谱。

在其中一实施例中，获取待测品的步骤包括以下步骤：

将待测治疗产品和溶剂进行混合，得到混合液；

将所述混合液进行超滤离心处理，收集滤液，所述滤液即为所述待测品。