[发明专利]一种评估肺癌耐药和转移发生风险的检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种评估肺癌耐药和转移发生风险的检测试剂盒，通过评估肺癌耐药和转移高风险miRNAs来评估化疗过程中发生耐药和转移风险的检测试剂盒。本发明中揭示了肺癌体内的一些特异性高表达的MicroRNAs（miRNAs）对肺癌化疗耐药的影响，由此可以通过检测这些miRNAs的表达水平来监测化疗用药效果情况，适时调整用药，延长化疗维持的时间，进而提高生存率。本发明旨在为评估肺癌化疗中耐药和转移发生风险提供一种新的监测方法，不仅能够对肺癌化疗效果进行检测，而且还可对预后进行评估，同时也为抗癌药物的研发提供重要的miRNAs靶点，有效改善肺癌的生存质量。

技术领域

本发明涉及检测试剂盒技术领域，尤其涉及一种评估肺癌耐药和转移发生风险的检测试剂盒。

背景技术

肺癌是一个重大的全球健康问题，目前仍是全世界最常见癌症致死原因之一，非小细胞肺癌(NSCLC)是最常见的一种，其五年生存率低于15％。尽管在手术、放疗、化疗和靶向治疗等治疗方面取得了较大进展，但由于大多数在之后化疗过程中出现耐药和转移，导致很难进一步维持治疗下去，预后仍然很差。因此，需要一些指标来衡量和预估化疗过程中的有效程度，而在化疗的过程中体内的miRNAs水平通常会发生改变，已有很多研究证明，miRNAs的变化与肿瘤化疗耐药和肿瘤转移息息相关，这提示我们在临床可以对miRNAs进行监测，从而指导化疗用药。

微小RNA(microRNA，miRNA)是一类由18-25个核苷酸组成的小RNA，其不编码蛋白质，而对基因的转录与翻译起重要的调控作用。miRNAs的序列具有高度的物种保守性，其表达具有独特的时间特异性和空间特异性。已经证明，miRNAs在胚胎发育、组织分化、细胞代谢、信号通路控制等生理过程中发挥巨大的调控作用，特别是部分miRNAs被发现具有肿瘤抑制因子或原癌基因的功能，在癌症及其他疾病的诊断和治疗中发挥重要的作用。因此，miRNAs作为非编码RNA的代表，是当今分子生物学和表观遗传学研究的热门方向之一。而我们发现在肺癌体内某些miRNAs的高表达，与肿瘤转移和化疗耐药密切相关。

目前化疗依然是肺癌基础治疗的主要手段，而化疗过程中耐药和转移的发生和进展往往是阻碍其疗效的最大障碍，但是现如今并没有有效控制耐药和转移发生的方法，只能早发现，适时调整用药或联合用药来改善治疗效果，但很多时候临床上不能很好的判断耐药和转移的发生，使得肿瘤的发展有了进一步发展的机会。本发明综合考虑实用性和有效性，利用对临床miRNAs含量长期的监测分析，发现了一些在肺癌耐药及转移病人体内高表达的miRNAs，称为耐药高风险miRNAs，从而开发出了检测分析高风险miRNAs组合的检测试剂盒，方便实时监测评估受检者的耐药情况。

本发明针对在肺癌耐药和转移特异性高表达的一些miRNAs(称为耐药高风险miRNAs)，制造出一种可以检测这些miRNAs在肺癌体内表达情况的试剂盒，用于监测肺癌化疗过程中出现耐药及转移的风险，并可对预后进行评估。试剂盒主要包括三部分：针对肿瘤组织的实时荧光定量PCR检测试剂盒、针对外周血液的实时荧光PCR检测试剂盒和一个特制的可针对PCR结果进行分级定性的程序。主要检测的高风险miRNAs如下：miR-324-5p、miR-210-3p、miR-421、miR-21、miR-661、miR-106a、miR-27a、miR-346及miR-423-3p。通过对肺癌瘤组织和外周血检测的双重检测手段和多种高风险miRNAs组合的信息支持及分级定性程序来评估耐药和转移发生的风险。

发明内容

本发明提供一种评估肺癌耐药和转移发生风险的检测试剂盒，解决现有技术中的临床上不能很好的判断耐药和转移的发生等技术问题。

本发明采用以下技术方案：一种评估肺癌耐药和转移发生风险的检测试剂盒，包括三部分：