[发明专利]miRNA标志物在制备奥氮平治疗精神分裂症疗效评估方面的产品中的应用及试剂盒

权利要求书

1.一种miRNA标志物的检测试剂在制备奥氮平治疗精神分裂症疗效评估方面的产品中的应用，其特征在于，所述miRNA标志物为miR-143-3p。

2.根据权利要求1所述的miRNA标志物的检测试剂在制备奥氮平治疗精神分裂症疗效评估方面的产品中的应用，其特征在于，包括对miRNA标志物miR-143-3p表达量进行检测，所述检测方法，具体包括以下步骤：

步骤一：血清样本的处理，采血、离心、保存备用；所述血清样本为奥氮平治疗无效的精神分裂症患者与奥氮平治疗有效的精神分裂症患者的外周血；

步骤二：总RNA的提取；

步骤三：使用超微量分光光度计检测RNA的总量；

步骤四：进行反转录获得cDNA，将得到的cDNA进行荧光定量检测。

3.根据权利要求2所述的miRNA标志物的检测试剂在制备奥氮平治疗精神分裂症疗效评估方面的产品中的应用，其特征在于，所述步骤三中，用超微量分光光度计检测在260mm处的吸光度，计算RNA的总量。

4.根据权利要求2所述的miRNA标志物的检测试剂在制备奥氮平治疗精神分裂症疗效评估方面的产品中的应用，其特征在于，步骤四中，反转录所用的miRNA标志物miR-143-3p的引物，包括miR-143-3p上游引物、miR-143-3p下游引物和stem-loop RT1的引物，所述miR-143-3p上游引物如SEQ ID NO：1所示，所述miR-143-3p下游引物如SEQ ID NO：2所示，所述stem-loop RT1的引物如SEQ ID NO：3所示。

5.根据权利要求2所述的miRNA标志物的检测试剂在制备奥氮平治疗精神分裂症疗效评估方面的产品中的应用，其特征在于，步骤四中，反转录时，用于检测所述的miRNA标志物表达量的内参引物，包括内参上游引物、内参下游引物和stem-loop RT2的引物，所述内参为U6 RNA，所述U6 RNA的上游引物如SEQ ID NO：4所示，所述U6 RNA的下游引物如SEQ IDNO：5所示，所述stem-loop RT2的引物如SEQ ID NO：6所示。

6.根据权利要求2所述的miRNA标志物的检测试剂在制备奥氮平治疗精神分裂症疗效评估方面的产品中的应用，其特征在于，所述miRNA标志物miR-143-3p存在于外周血及神经细胞中，当奥氮平对精神分裂症患者有效时，外周血及神经细胞中的miR-143-3p表达水平均上调。

7.根据权利要求1所述的miRNA标志物的检测试剂在制备奥氮平治疗精神分裂症疗效评估方面的产品中的应用，所述产品为试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括miRNA标志物miR-143-3p的引物和所述检测miRNA标志物表达量的内参引物。

8.根据权利要求7所述的miRNA标志物的检测试剂在制备奥氮平治疗精神分裂症疗效评估方面的产品中的应用，其特征在于，所述miRNA标志物miR-143-3p的引物，包括miR-143-3p上游引物、miR-143-3p下游引物和stem-loop RT1的引物，所述miR-143-3p上游引物如SEQ ID NO：1所示，所述miR-143-3p下游引物如SEQ ID NO：2所示，所述stem-loop RT1的引物如SEQ ID NO：3所示；用于检测miRNA标志物miR-143-3p表达量的内参引物，包括内参上游引物、内参下游引物和stem-loop RT2的引物，所述内参为U6 RNA，所述U6 RNA的上游引物如SEQ ID NO：4所示，所述U6RNA的下游引物如SEQ ID NO：5所示，所述stem-loop RT2的引物如SEQ ID NO：6所示。

9.根据权利要求7所述的miRNA标志物的检测试剂在制备奥氮平治疗精神分裂症疗效评估方面的产品中的应用，其特征在于，所述试剂盒包括以下用于20μL PCR反应体系的试剂：2×miRNA L-RT Solution mix 10μL、miRNA L-RT Enzyme Mix 1.5μL，10μM的Stem-loop primer 1μL、RNase-Free dd H₂O至总体积20μL。