[发明专利]CD19和CD22双靶点嵌合抗原受体NK细胞及其应用有效
| 申请号： | 202010942436.8 | 申请日： | 2020-09-09 |
| 公开（公告）号： | CN112029729B | 公开（公告）日： | 2023-03-31 |
| 发明（设计）人： | 汤朝阳;请求不公布姓名;秦乐;吴迪;魏志辉;王翠花;杨凯纯 | 申请（专利权）人： | 广东昭泰体内生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867;C12N7/01;C07K19/00;C07K16/28;A61K39/00;A61P35/02 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 510663 广东省广州市高新技术产业开发区科学城揽月路*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | cd19 cd22 双靶点 嵌合 抗原 受体 nk 细胞 及其 应用 | ||
1.一种靶向CD19和CD22的嵌合抗原受体NK细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体NK细胞表达特异性结合CD19和CD22的嵌合抗原受体；
所述嵌合抗原受体包括信号肽、抗原结合结构域、跨膜结构域和信号转导结构域；
所述抗原结合结构域包括抗CD19单链抗体和抗CD22单链抗体；
所述抗CD19单链抗体包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；
所述抗CD22单链抗体包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；
所述抗CD19单链抗体和抗CD22单链抗体通过连接肽连接；
所述信号肽包括GM-CSF信号肽；
所述跨膜结构域为CD28；
所述信号转导结构域为CD3ζ；
所述嵌合抗原受体由GM-CSF信号肽、抗CD19单链抗体、连接肽、抗CD22单链抗体、CD28和CD3ζ串联组成；
所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
2.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有特异性结合CD19和CD22的嵌合抗原受体的编码序列；
所述表达载体为含有GM-CSF信号肽编码序列、抗CD19单链抗体编码序列、连接肽编码序列、抗CD22单链抗体编码序列、CD28编码序列和CD3ζ编码序列的慢病毒载体；
所述表达载体为含有SEQ ID NO:4所示的核酸序列的慢病毒载体。
3.一种重组慢病毒，其特征在于，所述重组慢病毒采用权利要求2所述的表达载体和辅助质粒共转染哺乳细胞制备得到。
4.一种权利要求1所述的嵌合抗原受体NK细胞的制备方法，其特征在于，所述方法包括将权利要求3所述的重组慢病毒导入NK细胞的步骤。
5.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求1所述的嵌合抗原受体NK细胞。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
7.一种权利要求1所述的嵌合抗原受体NK细胞和/或权利要求5或6所述的药物组合物在制备疾病治疗药物中的应用，
所述疾病为CD19阳性和/或CD22阳性疾病。
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