[发明专利]一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器

权利要求书

1.一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器，其特征在于，该传感器由以下步骤制备得到：

A.特定DNA的生成：如SEQ ID No:1所示的生物素标记的AMP核酸适配体、如SEQ ID No:2所示的载体DNA1及如SEQ ID No:3所示的杂交链式反应HCR引发链DNA杂交形成双链DNA检测探针；于双链DNA检测探针中加入梯度浓度的氨苄西林标准品，在T4 DNA连接酶和核酸外切酶III的辅助下得到APH链；

B.特定DNA的捕获及HCR反应：将上述APH链加入到链霉亲和素包被的聚苯乙烯微孔板中，使APH链被捕获到微孔板中作为HCR引发链；于微孔板中加入如SEQ ID No:4所示的发夹DNA1和如SEQ ID No:5所示的发夹DNA2，由HCR引发链将发夹DNA1和发夹DNA2交叉打开，最后加入荧光染料SYBR Green I指示剂，根据不同的荧光强度建立氨苄西林检测标准曲线。

2.如权利要求1所述一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器，其特征在于，所述AMP核酸适配体、载体DNA1及杂交链式反应HCR引发链DNA的浓度和体积相同。

3.如权利要求1所述一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器，其特征在于，所述氨苄西林标准品溶液的梯度浓度为10^-18-10^-10g/mL。

4.如权利要求1所述一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器，其特征在于，所述T4 DNA连接酶和核酸外切酶III的辅助作用时间均为20-40min。

5.如权利要求1所述一种双酶介导级联信号放大的氨苄西林检测适体传感器，其特征在于，所述荧光强度检测时激发波长为490nm，发射波长为520nm。