[发明专利]影响MDK基因调节胶质瘤迁移和侵袭的分子机制及应用

说明书

本发明涉及了影响MDK基因调节胶质瘤迁移和侵袭的分子机制及应用。1)Western blot分析胶质母细胞瘤细胞系MDK表达，3)过表达MDK基因对胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响，2)慢病毒介导敲除MDK基因对胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响，4)对干扰MDK基因表达后的细胞系中P‑PI3K，PI3K，Akt，p‑ERK及vimentin，beta‑catenin进行Western blot分析。本发明提供了一种胶质瘤治疗的新思路，为研究胶质母细胞瘤药物治疗靶点提供了新途径。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，它涉及一种影响MDK基因以调节胶质瘤迁移和侵袭的分子机制及其应用。

背景技术

胶质瘤是脑和脊髓最常见的原发肿瘤，即使在治疗胶质瘤上取得了重大的进展，胶质瘤的死亡率仍居高不下。研究表明高侵袭性是胶质瘤生存率低的重要原因之一[Quinn,T,Ostrom,etal.CBTRUSStatistical Report:PrimaryBrainandCentralNervousSystemTumorsDiagnosedin theUnitedStatesin2008-2012.[J].NeuroOncology,2015.]。因此，寻找介导胶质瘤迁移和侵袭的机制将会为治疗胶质瘤提供新的见解。MDK编码一种肝素结合生长因子，MDK编码蛋白在肿瘤发生过程中会促进细胞生长[HoribaM,KadomatsuK,NakamuraE,etal.Neointimaformationinarestenosismodelissuppressedin midkine-deficientmice[J].J.clin.invest,2000,105(4):489-95.]、迁移[MuramatsuH,ZouK,SakaguchiN,etal.LDLreceptor-relatedprotein asacomponentofthemidkinereceptor.[J].BiochemBiophysRes Commun,2000,270(3):936-941.]和血管生成[JuanL,Qi-HuiL,FanW,etal.ExosomalmiR-9inhibitsangiogenesisbytargetingMDKand regulatingPDK/AKTpathwayinnasopharyngealcarcinoma[J].Journal ofExperimentalClinicalCancerResearch,2018,37(1):1-12.]。MDK能与NOTCH2相互作用，从而导致HES1和STAT3之间的相互作用促进细胞上皮间充质转化[HuangY,HoqueMO,WuF,etal.Midkineinducesepithelial-mesenchymaltransitionthrough Notch2/Jak2-Stat3signalinginhumankeratinocytes[J].CellCycle,2008,7(11):1613-1622.]。同样地，该基因可以编码多个异构体的剪接转录体[SakaguchiN,MuramatsuH,Ichihara-TanakaK,etal.Receptor-type proteintyrosinephosphatasezetaasacomponentofthesignalingreceptorcomplexformidkine-dependentsurvivalofembryonic neurons.[J].NeuroenceResearch,2003,45(2):219-224.]。MDK在许多肿瘤中均有过表达的情况，包括非小细胞肺癌、甲状腺癌和低级别胶质瘤等[MDKProteinOverexpressionCorrelateswiththeMalignantStatus andPrognosisofNon-smallCellLungCancer[J].ArchivesofMedicalResearch,2015,46(8):635-641.ChoiYW,KimYH,LeeJ,etal.Strong immunoexpressionofmidkineisassociatedwithmultiplelymphnode metastasesinBRAFV600Epapillarythyroidcarcinoma[J].Human Pathology,2015,46(10):1557-1565.]。研究发现MDK能够激活激活磷酸肌醇3激酶(PI3K)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)[OhuchidaT,OkamotoK,AkahaneK,etal.Midkineprotectshepatocellular carcinomacellsagainstTRAIL-mediatedapoptosisthrough down-regulationofcaspase-3activity[J].Cancer,2004.]，进而诱导肿瘤细胞增殖，增强血管生成和抗凋亡活性。因此MDK基因常作为治疗多种不同疾病的靶点。然而，MDK影响胶质瘤细胞迁移和侵袭的机制尚未明确。