[发明专利]一种用于评价浆水质量的微生物组合物、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种快速评价浆水质量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)根据标准菌菌落数CFU和扩增循环数Ct值分别绘制标准曲线，所述标准菌包括大肠杆菌属任一种菌、乳杆菌属任一种菌和醋酸杆菌属任一种菌；

(2)分别获得待测浆水中微生物组合物中每一组分的qPCR扩增循环数Ct值，所述微生物组合物包括选自大肠杆菌属中的任一种菌、乳杆菌属中的任一种菌、醋酸杆菌属中的任一种菌；

(3)分别将步骤(2)所得的Ct值代入到步骤(1)所述对应的标准曲线中，计算获得微生物组合物中每一组分的菌落数CFU；

(4)根据下式①-③获得的微生物组合物中每一组分的相对菌落数：

式①Lactobacillus＝X_Lc-X_s1，

式②Acetobacter＝X_aab-X_s2，

式③Enterobacter＝X_Ec-X_s3；

所述X_s1＝4(log(CFU/mL))，所述X_s2＝3(log(CFU/mL))，所述X_s3＝3(log(CFU/mL))；所述X_Lc为检测获得的乳杆菌属的菌落数CFU，所述X_aab为检测获得的醋酸杆菌属的菌落数CFU，所述X_Ec为检测获得的大肠杆菌属的菌落数CFU；

(5)将上式①-③代入综合评分公式④计算获得待测浆水的质量评分：

式④Z＝a×Lactobacillus+b×Acetobacter+c×Enterobacter；

所述a、b、c根据灰色关联分析法分析获得；其中，所述评分越高表示待测浆水的质量越好。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的标准菌为大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和醋酸杆菌Acetobacterpasteuri anus。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中qPCR扩增涉及的扩增引物对包括如SEQ ID NO：1-2所示引物对、SEQ ID NO：3-4所示引物对、SEQ ID NO：5-6所示引物对、SEQ ID NO：7-8所示引物对、SEQ ID NO：9-10所示引物对和SEQ ID NO：13-14所示引物对中的至少一对，如SEQ ID NO：15-16所示引物对、SEQ ID NO：17-18所示引物对、SEQ IDNO：19-20所示引物对、SEQ ID NO：21-22所示引物对中的至少一对，如SEQ ID NO：23-24所示引物对、SEQ ID NO：25-26所示引物对、SEQ ID NO：29-30所示引物对、SEQ ID NO：31-32所示引物对、SEQ ID NO：33-34所示引物对和SEQID NO：35-36所示引物对中的至少一对。

4.如权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，所述步骤还包括：根据下式⑤计算获得待测浆水的相对pH值，并根据下式⑥计算获得待测浆水的质量评分：

式⑤pH＝-[X_pH-(X_s4+X_s5)/2]；

式⑥Z＝a×Lactobacillus+b×Acetobacter+c×Enterobacter+d×pH；

所述X_s4＝3，所述X_s5＝5；所述X_pH为待测浆水的pH值；所述a、b、c、d根据灰色关联分析法分析获得，其中，所述评分越高表示待测浆水的质量越好。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述式⑥为：Z＝0.2220×Lactobacillus+0.2043×Acetobacter+0.2192×Enterobacter+0.2239×pH。