[发明专利]一种用于评价浆水质量的微生物组合物、试剂盒及方法

说明书

本发明属于微生物检测技术领域，具体涉及一种用于评价浆水质量的微生物组合物、试剂盒及方法。本发明具体公开了利用qPCR技术快速检测浆水中标志性微生物并进行质量评估的应用，通过灰度关联分析模型来整合高通量测序结果的绝对OUT数目与理化指标pH，获取综合评分方程。构建标准曲线，结合综合评分方程后对浆水的优劣进行评价，该方法具有检测准确率高，特异性强、成本低，检测方便，速度快的优点，彻底解决了平板计数法无法直接评价浆水质量且评价结果不准确的缺陷，可以广泛用于浆水的安全性及等级评估。

技术领域

本发明属于微生物检测技术领域，具体涉及一种用于评价浆水质量的微生物组合物、试剂盒及方法。

背景技术

浆水是中国北方(如：甘肃，宁夏，山西和河南等)最受欢迎和常见的一种发酵食品，它有3000多年的悠久历史，夏季和秋季经常在家中生产和食用，可用多种蔬菜制成，例如白菜，芹菜和萝卜等。其独特的风味和丰富的营养使其成为解渴和降温的绝佳选择。而且，研究证明，浆水有益于消化，降低胆固醇和降低血压，使其适合日常食用。

作为一种发酵食品，浆水的口味和品质与氨基酸，各种有机酸和碳水化合物等代谢产物有关，而这些都与浆水中的微生物密不可分。然而，一方面，浆水在家庭水平上产生导致彼此不同，甚至包含一些病原细菌(大肠杆菌(E.coli))。另一方面，特别是生产过程中微生物评估的质量控制严重滞后，这对人们的健康和食品安全构成潜在威胁。因此，迫切需要建立一种高效且快速的技术来检测浆水中的微生物并结合关键理化指标来进行质量评估。

现有技术一般通过检测微生物的含量来评估浆水的质量，其中常用平板计数法，但是平板计数法耗时、分辨率低、且只能间接评定，并不能精准量化。定量PCR由于其快速，准确的功能而在食品质量控制研究中发挥着重要作用，也成为了目前最常用的方法之一。但是，不同的发酵食品含有不同的微生物。同样，与泡菜、酸菜等其他发酵蔬菜食品不同，浆水是天然发酵的蔬菜食品，它不需要盐以及各种调味料，形成了其独特的酸味和特殊的微生物多样性和组成，因此单独的定量PCR检测在用于浆水质量的评价过程中也仅仅只是更准确的获得浆水中微生物的含量，依据不同微生物的含量确定浆水的质量，并不能准确、科学的评定浆水质量。

浆水中含量较多的微生物主要包括乳杆菌、醋酸杆菌、大肠杆菌、小球菌、念珠菌，孢子皮癣、棘孢菌等。本发明选择益生菌中的乳杆菌属、醋酸杆菌属以及有害细菌大肠杆菌属为浆水质量评定的微生物组合物，并通过利用qPCR技术快速检测浆水中标志性微生物并进行质量评估的应用，通过灰度关联分析模型来整合高通量测序结果的绝对OUT数目与理化指标pH，获取综合评分方程。构建标准曲线，结合综合评分方程后对浆水的优劣进行评价，该方法具有检测准确率高，特异性强、成本低，检测方便，速度快的优点，彻底解决了平板计数法无法直接评价浆水质量且评价结果不准确的缺陷，可以广泛用于浆水的安全性及等级评估。

发明内容

针对上述技术问题，本发明的目的在于提供一种用于评价浆水质量的微生物组合物，所述微生物组合物包括选自大肠杆菌属中的任一种、乳杆菌属中的任一种、醋酸杆菌属中的任一种。

本发明的另一目的在于提供一种用于评价浆水质量的试剂盒，所述试剂盒包括测定所述微生物组合物的量化试剂和标准曲线。

优选地，所述量化试剂包括qPCR扩增引物对，所述PCR扩增引物对用于qPCR扩增获得所述微生物组合物中的每一组分的循环数Ct值。

优选地，所述量化试剂为qPCR定量试剂。