[发明专利]一种快速检测单个生物大分子活性的方法

权利要求书

1.一种快速检测单个生物大分子活性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：使用PBS溶液配置一定浓度的辣根过氧化物酶溶液S1；

步骤2：使用PBS溶液和甘油以一定体积比混合，并向甘油/PBS混合溶液中，加入一定浓度的过氧化氢和3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液，作为酶催化底物溶液S2；

步骤3：将溶液S1和溶液S2混合得到酶促反应溶液S3；

步骤4：将溶液S2通过雾化器产生微小液滴并喷到暗场显微镜的基底材料上，通过暗场显微镜观察基底上微小液滴的暗场显微信号并记录；

步骤5：将溶液S3通过雾化器产生微小液滴并喷到暗场显微镜的基底材料上，通过暗场显微镜观察基底上微小液滴的暗场显微信号并记录；

步骤6：对比溶液S2和溶液S3喷雾形成的同样大小液滴的暗场信号，并分析溶液S3喷雾形成的液滴暗场信号和时间变化曲线，最终得到辣根过氧化物酶催化底物的动力学曲线和酶的活性。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1中PBS溶液浓度为0.01～1.0mol/L，PBS溶液pH值范围为3.0～8.0，辣根过氧化物酶的浓度为0.001nmol/L～1.0μmol/L。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2中甘油/PBS混合溶液中，甘油体积含量为5％～90％，过氧化氢的浓度为0.1～500mmol/L，3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液的浓度为0.05～5.0mmol/L。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述暗场显微镜的基底材料为普通玻璃片、十八烷基三氯硅烷修饰的玻璃片、金片、抛光后硅片、抛光后铝片、有机玻璃片的任意一种。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法检测大于或等于6.6*10^-20g的单个酶分子。