[发明专利]一种卡贝缩宫素杂质Gly9-OH的制备方法

权利要求书

1.一种卡贝缩宫素杂质Gly9-OH的制备方法，其特征在于，包括：

步骤1：固相合成Fmoc-Leu-树脂；

步骤2：根据卡贝缩宫素杂质Gly9-OH的肽序，在所述Fmoc-Leu-树脂上偶联氨基酸，得到Y-Tyr（Me）-OH-Ile-Gln（X）-Asn（X）-Cys（（CH₂）₃COOtBu）-Leu-树脂；所述氨基酸选自Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys（（CH₂）₃COOtBu）-OH、Y-Tyr（Me）-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Gln（X）-OH和Fmoc-Asn（X）-OH中的任一种或多种；所述偶联具体为依次偶联：

Fmoc-Cys（（CH₂）₃COOtBu）-OH、Fmoc-Asn（Trt）-OH、Fmoc-Gln（Trt）-OH、Fmoc-Ile-OH和Boc-Tyr(Me)-OH；

步骤3：将所述Y-Tyr（Me）-OH-Ile-Gln（X）-Asn（X）-Cys（（CH₂）₃COOtBu）-Leu-树脂裂解，得到卡贝缩宫素杂质直链粗品Y-Tyr（Me）-Ile-Gln(X)-Asn(X)-Cys（（CH₂）₃COOtBu）-Leu-OH；

步骤4：将卡贝缩宫素杂质直链粗品通过液相缩合偶联H-Gly-O(Z)，而后脱掉X、Y和tBu保护基得到H-Tyr（Me）-Ile-Gln-Asn-Cys（（CH₂）₃COOH）-Leu-Gly-O(Z)；

步骤5：将所述H-Tyr（Me）-Ile-Gln-Asn-Cys（（CH₂）₃COOH）-Leu-Gly-O(Z) 液相环化得到环化中间肽Cyclo[CH₂CH₂CH₂CO-Tyr(Me)-Ile-Gln-Asn-Cys]-Pro-Leu-Gly-O(Z)；

步骤6：将Cyclo[CH₂CH₂CH₂CO-Tyr(Me)-Ile-Gln-Asn-Cys]-Pro-Leu-Gly-O(Z)脱掉保护基Z，纯化，得到卡贝缩宫素杂质Gly9-OH； 所述纯化为采用Prep-HPLC纯化；

所述X为H、Mmt、Mtt或Trt； 所述Y为Fmoc或Boc； 所述Z为All或Bzl。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述树脂选自CTC Resin或2-CTCResin。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述Fmoc保护基的脱除剂是10％~50%体积浓度的哌啶或哌嗪的DMF溶液。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述裂解采用的裂解液包括TFA、PhSMe、EDT、TIS、TFE和H₂O的混合物。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述偶联采用的偶联剂为HBTU、HATU、PyBop、DIC、DCC、TBTU、HBOT、HOAT和Cl-HOBT中的一种或多种。