[发明专利]一种联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的引物和探针、试剂盒及应用在审
申请号: | 202010955621.0 | 申请日: | 2020-09-11 |
公开(公告)号: | CN112011646A | 公开(公告)日: | 2020-12-01 |
发明(设计)人: | 冯小宇;王英超;高晓龙;程汝佳;梅力;陈会玲;张启龙;吴迪;程敏姮 | 申请(专利权)人: | 北京市动物疫病预防控制中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
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地址: | 102629 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 联合 检测 非洲 猪瘟 病毒 狂犬病 野毒株 引物 探针 试剂盒 应用 | ||
1.一种联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的引物和探针,其特征在于,包括:
检测非洲猪瘟病毒的正向引物,其序列如SEQ ID NO:1所示;检测非洲猪瘟病毒的反向引物,其序列如SEQ ID NO:2所示;检测非洲猪瘟病毒的TaqMan探针,其序列如SEQ ID NO:3所示;
检测猪伪狂犬病病毒野毒株的正向引物,其序列如SEQ ID NO:4所示,检测猪伪狂犬病病毒野毒株的反向引物,其序列如SEQ ID NO:5所示,检测检测猪伪狂犬病病毒野毒株的TaqMan探针,其序列如SEQ ID NO:6所示。
2.根据权利要求1所述的联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的引物和探针,其特征在于:
所述的用于检测非洲猪瘟病毒的TaqMan探针,其5’端标记的荧光报告基团为FAM,3’端标记的荧光淬灭基团为BHQ1;
所述的用于检测猪伪狂犬病病毒野毒株的TaqMan探针,其5’端标记的荧光报告基团为VIC,3’端标记的荧光淬灭基团为BHQ1。
3.一种联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的双重实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:
包括引物、探针混合液,所述引物、探针混合液包含如权利要求1或2所述的联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的引物和探针。
4.根据权利要求3所述的联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的双重实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:
还包含qPCR预混液、阳性对照品、阴性对照品。
5.根据权利要求4所述的联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的双重实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:
所述阳性对照品为非洲猪瘟病毒B646L基因质粒标准物质与猪伪狂犬病病毒标准毒株的混合液,所述阴性对照品为无核酸酶水。
6.根据权利要求4所述的联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的双重实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:
所述qPCR预混液为Premix Ex Taq Probe qPCR 2X。
7.根据权利要求3所述的联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的双重实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:
所述引物、探针混合液中用于检测非洲猪瘟病毒的正向引物、反向引物、TaqMan探针的浓度均为0.1μmol/L;
所述引物、探针混合液中用于检测猪伪狂犬病病毒野毒株的正向引物、反向引物、TaqMan探针的浓度均为0.4μmol/L。
8.如权利要求1或2所述的联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的引物和探针在制备联合检测非洲猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒野毒株的试剂盒中的应用。
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