[发明专利]一种干细胞诱导培养液及其制备方法、应用有效

专利信息
申请号: 202010957658.7 申请日: 2020-09-10
公开(公告)号: CN112210531B 公开(公告)日: 2022-11-18
发明(设计)人: 李炳根;袁牧;赵晓彤 申请(专利权)人: 威海见生生物技术有限公司
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775
代理公司: 合肥中博知信知识产权代理有限公司 34142 代理人: 李金标
地址: 264203 山东省威海市环翠区张村镇黄河*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 干细胞 诱导 培养液 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种干细胞诱导培养液,其特征在于,所述干细胞培养液包括诱导剂、诱导培养基与PH缓冲液,所述诱导剂的含量为0.4-1.4μg/ml,诱导培养基的含量为0.6-2.8μg/ml,PH缓冲液的含量为0.03-0.5μg/ml。

2.根据权利要求1所述的一种干细胞诱导培养液,其特征在于,所述诱导剂为磺化β-环糊精或油酸,诱导培养基中含有胎牛血清、氨基酸、青霉素中任意两种或两种以上。

3.根据权利要求1所述的一种干细胞诱导培养液,其特征在于,所述PH缓冲液为无菌磷酸盐缓冲液,且其PH值为7.2-7.5。

4.根据权利要求1所述的一种干细胞诱导培养液,其特征在于,所述干细胞培养液采用将组织细胞进行分离培养而成,组织细胞包括人在内的哺乳类动物的组织细胞。

5.根据权利要求1-4任一所述的一种干细胞诱导培养液的制备方法及应用,其特征在于,包括如下步骤:

S1:先将脂肪组织去除血管、筋膜等无用组织后,制成糊状,加入胶原酶消化处理;

S2:然后加入培养基进行中和处理,并使用离心装置进行离心处理;

S3:去除上清液后加入细胞培养液进行培养细胞;

S4:在细胞融合至80-90%时进行消化传代,并在待第二代细胞生长至融合状态时,并在加入诱导剂、诱导培养基、PH缓冲液的生长培养基中进行培养。

6.根据权利要求5所述的一种干细胞诱导培养液的制备方法及应用,其特征在于,上述S2中离心装置包括箱体(1)、置于箱体(1)内的第一离心壳体(2)、第二离心壳体(3),以及装设于第一离心壳体(2)、第二离心壳体(3)底侧的离心结构,第一离心壳体(2)、第二离心壳体(3)结构一致且其相对称分布,箱体(1)内侧设有驱动第一离心壳体(2)、第二离心壳体(3)运转的驱动组件;所述驱动组件包括第一电机(4)与两转动杆(5),两转动杆(5)一端与第一离心壳体(2)、第二离心壳体(3)顶部固接,其另一端通过转轴与箱体(1)顶部转动式连接;两所述转动杆(5)上均套装有传动带轮(6),且两传动带轮(6)之间通过皮带联动,第一电机(4)装设于箱体(1)外侧且其输出端传动连接第二离心壳体(3)顶部的转动杆(5)。

7.根据权利要求6所述的一种干细胞诱导培养液的制备方法及应用,其特征在于,所述第一离心壳体(2)、第二离心壳体(3)底部均设有开口,其内侧中部固装固定座(7);所述离心结构包括转动连接于第一离心壳体(2)、第二离心壳体(3)侧壁以及固定座(7)侧端之间的螺杆(8)、套装于螺杆(8)上的螺套(9),以及置于第一离心壳体(2)、第二离心壳体(3)外侧且用于驱动螺杆(8)运转的手柄;所述固定座(7)底侧端部铰装有安装支架(10),安装支架(10)上装设有离心管件,安装支架(10)端部通过转动座活动连接有连杆(11),且连杆(11)的自由端活动连接螺套(9)端部。

8.根据权利要求7所述的一种干细胞诱导培养液的制备方法及应用,其特征在于,所述离心管件包括装设于安装支架(10)上的试管下托(12)、试管上托(13),试管上托(13)固定于安装支架(10)上部,试管上托(13)内侧端设有管夹(14),管夹(14)用于固定离心试管,管夹(14)外侧分布有齿条(15);所述试管上托(13)上装设有第二电机(16),第二电机(16)输出端连接有齿轮(17),且齿轮(17)与齿条(15)啮合。

9.根据权利要求8所述的一种干细胞诱导培养液的制备方法及应用,其特征在于,所述试管下托(12)固定于安装支架(10)下部,试管下托(12)具有一用于承托离心试管的腔体。

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