[发明专利]一种干细胞诱导培养液及其制备方法、应用

说明书

本发明属于细胞实验领域，具体公开了一种干细胞诱导培养液及其制备方法、应用，干细胞培养液包括诱导剂、诱导培养基与PH缓冲液，所述诱导剂的含量为0.4‑1.4μg/ml，诱导培养基的含量为0.6‑2.8μg/ml，PH缓冲液的含量为0.03‑0.5μg/ml，诱导剂为磺化β‑环糊精或油酸，诱导培养基中含有胎牛血清、氨基酸、青霉素中任意两种或两种以上。本发明的诱导培养液诱导速度快，诱导率高，可用于诱导不同大小脂肪细胞，具有良好的兼容性，有利于保证细胞活性的同时保持细胞功能的差异。

技术领域

本发明涉及细胞实验领域，具体为一种干细胞诱导培养液及其制备方法、应用。

背景技术

细胞培养技术指的是细胞在体外条件下的生长，在培养的过程中细胞不再形成组织(动物)。细胞培养技术作为一种培养细胞的技术方法在生物学领域已被深入广泛的应用于观察活细胞的形态结构和生命活动和细胞学、遗传学、免疫学、实验医学和肿瘤学等多种学科研究，无论对临床还是基础研究均具有重要意义。

干细胞再生医学研究的兴起为器官损伤的修复提供了新的治疗途径，其基本方法是将体外培养扩增的自体正常组织细胞。但传统培养方法诱导分化率不高，且时间较长。

发明内容

本发明的目的在于提供一种干细胞诱导培养液及其制备方法、应用，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种干细胞诱导培养液，所述干细胞培养液包括诱导剂、诱导培养基与PH缓冲液，所述诱导剂的含量为0.4-1.4μg/ml，诱导培养基的含量为0.6-2.8μg/ml，PH缓冲液的含量为0.03-0.5μg/ml。。

优选的，诱导剂为磺化β-环糊精或油酸，诱导培养基中含有胎牛血清、氨基酸、青霉素中任意两种或两种以上。

优选的，PH缓冲液为无菌磷酸盐缓冲液，且其PH值为7.2-7.5。

优选的，干细胞培养液采用将组织细胞进行分离培养而成，组织细胞包括人在内的哺乳类动物的组织细胞。

上述干细胞诱导培养液的制备方法、应用包括如下步骤：

S1：先将脂肪组织去除血管、筋膜等无用组织后，制成糊状，加入胶原酶消化处理；

S2：然后加入培养基进行中和处理，并使用离心装置进行离心处理；

S3：去除上清液后加入细胞培养液进行培养细胞；

S4：在细胞融合至80-90％时进行消化传代，并在待第二代细胞生长至融合状态时，并在加入诱导剂、诱导培养基、PH缓冲液的生长培养基中进行培养。

优选的，上述离心装置包括箱体、置于箱体内的第一离心壳体、第二离心壳体，以及装设于第一离心壳体、第二离心壳体底侧的离心结构，第一离心壳体、第二离心壳体结构一致且其相对称分布，箱体内侧设有驱动第一离心壳体、第二离心壳体运转的驱动组件；所述驱动组件包括第一电机与两转动杆，两转动杆一端与第一离心壳体、第二离心壳体顶部固接，其另一端通过转轴与箱体顶部转动式连接；两所述转动杆上均套装有传动带轮，且两传动带轮之间通过皮带联动，第一电机装设于箱体外侧且其输出端传动连接第二离心壳体顶部的转动杆。

优选的，第一离心壳体、第二离心壳体底部均设有开口，其内侧中部固装固定座；所述离心结构包括转动连接于第一离心壳体、第二离心壳体侧壁以及固定座侧端之间的螺杆、套装于螺杆上的螺套，以及置于第一离心壳体、第二离心壳体外侧且用于驱动螺杆运转的手柄；所述固定座底侧端部铰装有安装支架，安装支架上装设有离心管件，安装支架端部通过转动座活动连接有连杆，且连杆的自由端活动连接螺套端部。