[发明专利]制备气道细胞的组合物和方法有效
| 申请号： | 202010958307.8 | 申请日： | 2015-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN112011500B | 公开（公告）日： | 2023-10-24 |
| 发明（设计）人： | M·格赫德;L·尼克拉森 | 申请（专利权）人： | 耶鲁大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 董志勇 |
| 地址： | 美国康*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 细胞 组合 方法 | ||
1.源自诱导多能干(iPS)细胞的气道上皮细胞，其特征在于：
表达气道细胞表面标记，其中所述气道细胞表面标记包括克拉拉细胞分泌蛋白(CCSP)、细胞角蛋白5(KRT5)和FOXJ1；和
在培养中增殖而不丧失所述气道细胞表面标记的能力。
2.权利要求1所述的气道上皮细胞，其中所述气道上皮细胞是有纤毛的。
3.权利要求1所述的气道上皮细胞，进一步包括表达囊性纤维化跨膜传导调节蛋白(CFTR)。
4.权利要求1所述的气道上皮细胞，进一步包括表达β-微管蛋白IV、粘蛋白-5AC和P63中的至少一种。
5.权利要求1所述的气道上皮细胞，其中所述气道细胞表面标记以比得上在新鲜分离的人气道细胞上表达的水平表达。
6.权利要求1所述的气道上皮细胞，其中所述气道上皮细胞源自囊性纤维化人iPS细胞。
7.权利要求1所述的气道上皮细胞，其中所述气道上皮细胞能够在培养中增殖至少大约30天。
8.权利要求7所述的气道上皮细胞，其中所述气道上皮细胞能够在培养中增殖大于大约30天。
9.将诱导多能干(iPS)细胞分化为气道上皮细胞的方法，包括：
在缺少血清的情况下培养所述iPS细胞以诱导分化为定形内胚层(DE)细胞；
在存在血清的情况下培养所述DE细胞以诱导分化为前前肠内胚层(AFE)细胞；并且
在存在血清、细胞因子混合物和高浓度的视黄酸的情况下培养所述AFE细胞以诱导所述AFE细胞分化为所述气道上皮细胞。
10.权利要求9所述的方法，其中培养所述iPS细胞的步骤包括在存在激活素A的情况下培养所述iPS细胞以诱导分化至所述DE细胞。
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