[发明专利]靶核酸的检查方法及检查装置

权利要求书

1.一种靶核酸的检查方法，其特征在于，包括下述(1)～(5)的工序：

(1)工序(1)：将包含靶核酸的被检体与阳性对照核酸混合，得到所述被检体与阳性对照核酸的被检体混合物；

(2)工序(2)：将所述被检体混合物与包含表面活性剂的PCR缓冲液混合，得到缓冲液混合物；

(3)工序(3)：将所述缓冲液混合物的一部分添加到包含DNA聚合酶、阳性对照核酸及PCR反应对照核酸的PCR对照用固体组合物中；

(4)工序(4)：将所述缓冲液混合物的一部分添加到包含DNA聚合酶及1种或2种以上的PCR引物对的PCR反应用固体组合物中；

(5)工序(5)：对所述工序(3)及所述工序(4)的结果所生成的PCR产物进行检测。

2.如权利要求1所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，所述被检体为前房水或玻璃体。

3.如权利要求1或2所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，所述被检体的量为12～20μL。

4.如权利要求1～3的任一项所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，所述被检体包含选自下组的至少一种病原体：单纯疱疹病毒1型HSV-1及单纯疱疹病毒2型HSV-2、水痘带状疱疹病毒VZV、爱泼斯坦-巴尔二氏病毒EBV、人类疱疹病毒6型HHV-6、巨细胞病毒CMV、人类T细胞白血病病毒HTLV-1、梅毒螺旋体及弓形虫。

5.如权利要求1～4的任一项所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，在所述工序(1)中，阳性对照核酸是管家基因。

6.如权利要求5所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，在所述工序(1)中，阳性对照核酸是TATA-结合蛋白TBP。

7.如权利要求1～6的任一项所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，在所述工序(2)中，表面活性剂是非离子性表面活性剂。

8.如权利要求1～7的任一项所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，在所述工序(2)中，PCR缓冲液是包含KCl、MgCl₂及dNTP混合物的Tris缓冲液，所述dNTP混合物是由dATP、dGTP、dCTP及dTTP构成的混合物。

9.如权利要求1～8的任一项所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，在所述工序(2)中，PCR缓冲液包含以下物质：与吸附于DNA聚合酶的源自生物的负电荷物质及吸附于DNA的源自生物的正电荷物质这样的抑制PCR的物质结合，从而中和所述负电荷物质及所述正电荷物质的PCR抑制作用的物质。

10.如权利要求1～9的任一项所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，在所述工序(3)中，阳性对照核酸及PCR反应对照核酸的至少任一方是管家基因。

11.如权利要求1～10的任一项所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，在所述工序(3)中，阳性对照核酸与所述工序(1)的阳性对照核酸相同。

12.如权利要求1～11的任一项所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，在所述工序(3)中，阳性对照核酸是TATA-结合蛋白TBP、PCR反应对照核酸是甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH。

13.如权利要求1～12的任一项所述的靶核酸的检查方法，其特征在于，在所述工序(4)中，PCR引物对是用于对单纯疱疹病毒1型HSV-1或单纯疱疹病毒2型HSV-2、水痘带状疱疹病毒VZV、爱泼斯坦-巴尔二氏病毒EBV、人类疱疹病毒6型HHV-6、巨细胞病毒CMV、人类T细胞白血病病毒HTLV-1、梅毒螺旋体或者弓形虫进行检测的PCR引物对。