[发明专利]一种筛选香水莲花花香优良品种的方法

权利要求书

1.一种筛选香水莲花花香优良品种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）采摘不同品种香水莲花的盛花期S3花朵；

香水莲花的花期划分标准为：花蕾期S1，花瓣完全被萼片包裹，花蕾紧实，花瓣未展开；初花期S2，苞片开裂，露出花被片，雄蕊群未开裂散粉，仅少量或半数花瓣可见；盛花期S3，花朵完全开放，花瓣和雄蕊完全可见且未发黑，雄蕊群自外向内开裂散出大量的花粉，花萼向四周开展；末花期S4，花瓣边缘皱缩，花药完全脱落，雄蕊发黑，花朵收缩即将凋谢；

2）将不同品种香水莲花的盛花期S3花朵用清水冲洗干净，切去花萼，然后将20～25g花朵放入透明玻璃容器中用1000mL 100℃沸水冲泡3～5min，如茶香浓郁，茶色金黄透亮，且冲泡30min后，茶色和花朵颜色不变，确定该品种香水莲花为香水莲花中花香优良品种；

还包括确定香水莲花花香优良品种的4项辅助筛选手段，分别为：

3.1）测定不同品种香水莲花盛花期S3花朵的花香物质成分：对不同品种香水莲花盛花期S3鲜花的花香物质成分进行检测和分析，统计所测得的挥发性香气物质种类Vi，挥发性香气物质总相对含量Ti，主要香气物质相对含量Mi，香水莲花花香优良品种Vi≥110，Ti≥99%，Mi≥75%，所述主要香气物质包括十五烷、乙酸苯基甲基酯、苯甲醇、6,9-十七碳二烯(6E,9E)、8-十七烷烯、顺式-α金合欢烯和反式-α香柑油烯；

3.2）观察不同品种香水莲花盛花期S3花朵的花瓣香气分泌结构：通过扫描电镜观察花瓣的表皮结构，香水莲花花香优良品种的花瓣表面乳突状凸起的密度ρ≥18个/mm²，凸起边缘清晰饱满；透射电镜观察花瓣的超微结构，香水莲花花香优良品种的花瓣细胞内质体直径d≥1.85μm；

3.3）测定花香相关基因DXR、LIS、LOX和PMK相对于内参基因AP47的表达水平：收集生长于同一环境下不同花期，包括花蕾期S1、初花期S2、盛花期S3和末花期S4的不同品种香水莲花的花朵，然后测定不同品种香水莲花的4个花香相关基因DXR、LIS、LOX和PMK在不同花期的表达量，香水莲花花香优良品种的DXR基因在盛花期S3的相对表达量≥11.2、LIS基因在花蕾期S1的相对表达量≥174.5、LOX基因在花蕾期S1的相对表达量≥1.33、PMK基因在盛花期S3的相对表达量≥3.85；

3.4）测定花茶的挥发性香气物质：对步骤1）中收集的不同品种香水莲花制备干花，然后干花泡水，制得花茶，对花茶的挥发性香气物质进行检测和比较，统计所测得的挥发性香气物质种类为TVi，挥发性香气物质总相对含量TTi，香水莲花花香优良品种TVi≥70，TTi≥88%。

2.根据权利要求1所述的筛选香水莲花花香优良品种的方法，其特征在于：当上述4项辅助筛选手段同时达标，则步骤2）确定的香水莲花花香优良品种的判定结果更精确。

3.根据权利要求2所述的筛选香水莲花花香优良品种的方法，其特征在于：步骤3.1）中，采用顶空固相微萃取-气质联用技术检测香水莲花盛花期S3鲜花的花香物质，其中，顶空固相微萃取对香水莲花鲜花挥发性香气物质吸附的条件为：采用PDMS/DVB-65μm型号的萃取头，吸附温度为45℃，吸附时间为50min，香水莲花新鲜花瓣用量为2g，解吸时间为3min。

4.根据权利要求3所述的筛选香水莲花花香优良品种的方法，其特征在于：步骤3.3）中，通过实时荧光定量PCR技术测定花香相关基因DXR、LIS、LOX和PMK的表达量。