[发明专利]从红曲霉发酵液中提取分离粗多糖的方法

权利要求书

1.一种从红曲霉发酵液中提取分离粗多糖的方法，其特征在于：由以下步骤组成：

(1)将红曲霉发酵液抽滤除去菌丝体和不溶物，得到的滤液减压浓缩为原体积的20％-30％，加入等体积的乙酸乙酯萃取，然后除去乙酸乙酯层；

(2)向得到的水层中加入粉末状活性炭，室温下磁力搅拌，然后抽滤除去活性炭粉末；

(3)滤液经减压浓缩至原体积的5％-10％，然后将其透析，将透析完的保留液减压浓缩至原体积的5％-10％，重复透析2-3次；

(4)将浓缩液倒入乙醇溶液中，边倾倒边搅拌使其混合均匀，于1-5℃环境下放置20-24h，使其充分沉淀；

(5)离心得沉淀部分，采用无水乙醇和丙酮分别洗涤沉淀2-3次，将最终获得的沉淀烘干，得多糖粗品；

(6)将多糖粗品配制成浓度为5-6％的溶液，加入Sevag溶液，漩涡震荡，然后离心，吸取上层多糖溶液重复操作至界面无白色胨状物出现为止；

(7)将上层多糖溶液离心除去不溶物，减压浓缩后冷冻干燥，即得到粗多糖。

2.根据权利要求1所述的从红曲霉发酵液中提取分离粗多糖的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的红曲霉发酵液的发酵条件为马铃薯葡萄糖琼脂培养基，配方组成为马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂15-20克以及蒸馏水1000毫升；28℃摇床培养15天。

3.根据权利要求1所述的从红曲霉发酵液中提取分离粗多糖的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的采用2-3层滤纸抽滤除去菌丝体和不溶物；所述加入等体积的乙酸乙酯萃取1.0-2h，除去乙酸乙酯层，重复操作3-5次。

4.根据权利要求1所述的从红曲霉发酵液中提取分离粗多糖的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的粉末状活性炭的加入量为体积分数1.0％-1.5％，磁力搅拌24-26h，然后采用2-3层滤纸抽滤以除去活性炭粉末。

5.根据权利要求1所述的从红曲霉发酵液中提取分离粗多糖的方法，其特征在于：步骤(3)中所述的于MwCO3500的透析袋中透析12-18h。

6.根据权利要求1所述的从红曲霉发酵液中提取分离粗多糖的方法，其特征在于：步骤(4)中所述的乙醇的浓度为95％，乙醇的体积是倒入的浓缩液体积的10-12倍。

7.根据权利要求1所述的从红曲霉发酵液中提取分离粗多糖的方法，其特征在于：步骤(5)中所述的离心转速为3000-4000r/min，离心时间10-15min；所述的洗涤沉淀2-3次，并于50-55℃烘干12-24h。

8.根据权利要求1所述的从红曲霉发酵液中提取分离粗多糖的方法，其特征在于：步骤(6)中所述的Sevag溶液为氯仿:正丁醇＝4:1的体积比混合液，Sevag溶液加入的体积为多糖溶液体积的15％-25％。

9.根据权利要求1所述的从红曲霉发酵液中提取分离粗多糖的方法，其特征在于：步骤(6)中所述的漩涡震荡10-15min，然后于7000-8000r/min转速下离心8-12min。

10.根据权利要求1所述的从红曲霉发酵液中提取分离粗多糖的方法，其特征在于：步骤(7)中所述的离心转速为3000-4000r/min，离心时间10-15min，冷冻干燥温度为-10℃至-50℃，干燥室真空度＜0.11MPa，干燥时间24-28h。