[发明专利]一种新型冠状病毒荧光qRT-PCR法快速检测体系

权利要求书

1.引物探针组合物，其特征在于，包括选自如下的引物探针组：

用于检测新型冠状病毒ORF1ab基因的引物探针组A，所述引物探针组A包括SEQ IDNO.1所示的正向引物，SEQ ID NO.2所示的反向引物，SEQ ID NO.3所示的探针；

用于检测新型冠状病毒N基因的引物探针组B，所述引物探针组B包括SEQ ID NO.4所示的正向引物，SEQ ID NO.5所示的反向引物，SEQ ID NO.6所示的探针；

用于检测内标的引物探针组C，所述引物探针组C包括SEQ ID NO.7所示的正向引物，SEQ ID NO.8所示的反向引物，SEQ ID NO.9所示的探针。

2.一种用于新型冠状病毒检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1所述的引物探针组合物。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述引物探针组A和B的引物在RT-PCR反应体系中的终浓度均为0.8μM，所述引物探针组A和B的探针在RT-PCR反应体系中的终浓度均为0.4μM，所述引物探针组C的引物在RT-PCR反应体系中的终浓度为0.4μM，所述引物探针组C的探针在RT-PCR反应体系中的终浓度为0.2μM。

4.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括Tris缓冲液、镁离子、dA/G/C/UTPs、DNA聚合酶、逆转录酶、Anti-Taq、BSA、UNG酶、RNasin。

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述逆转录酶终浓度为0.4U/μL，所述镁离子终浓度为10mM。

6.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述引物探针组A和B的引物终浓度均为0.8μM、所述引物探针组A和B的探针终浓度均为0.4μM、所述引物探针组C的引物终浓度均为0.4μM、所述引物探针组C的探针终浓度均为0.2μM、所述镁离子终浓度为10mM、所述dATP终浓度为0.4mM、所述dCTP终浓度为0.4mM、所述dGTP终浓度为0.4mM、所述dUTP终浓度为0.8mM、所述DNA聚合酶终浓度为0.2U/μL、所述逆转录酶终浓度为0.4U/μL、所述Anti-Taq终浓度为0.2U/μL、所述BSA终浓度为0.26％、所述UNG酶终浓度为0.004U/μL、所述RNasin终浓度为0.32U/μL。

7.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性对照品和阴性对照品。

8.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述新型冠状病毒的样本来源于人鼻咽拭子、痰液样本、肺泡灌洗液样本、血液样本、粪便样本或环境样本。

9.如权利要求1所述的引物探针组合物在制备通过如下方法检测新型冠状病毒的试剂盒的应用，其特征在于，所述方法包括：

样本采集、新型冠状病毒核酸提取、核酸扩增、结果判定；

所述结果判定包括在核酸扩增步骤得到的扩增曲线上的指数扩增阶段设定阈值，得到对应的Ct值，根据Ct值判定新型冠状病毒核酸检测结果；

其中对于新型冠状病毒核酸检测结果的判定是同一核酸扩增反应体系中针对新型冠状病毒两个靶基因的核酸扩增得到的两个Ct值综合判定。

10.一种用于新型冠状病毒检测的RT-PCR反应体系，其特征在于，所述反应体系包括权利要求1所述的引物探针组合物，且还包括Tris缓冲液、镁离子、dA/G/C/UTPs、DNA聚合酶、逆转录酶、Anti-Taq、BSA、UNG酶、RNasin。