[发明专利]一种抗4-1BB/PD-L1双特异性抗体及其用途

说明书

本发明提供了抗PD‑L1/4‑1BB双特异性抗体的构建、制备及用途。具体地，本发明提供了一种抗PD‑L1/4‑1BB的双特异性抗体，该抗体具有阻断PD‑L1与受体PD‑1结合的功能。同时该双特异性抗体还可以结合免疫细胞上的4‑1BB，激活肿瘤微环境中的免疫细胞活性，更有效地提高抑制肿瘤发生和发展的效果。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种抗4-1BB/PD-L1双特异性抗体及其用途。

背景技术

程序性死亡因子1配体1(programmed death 1ligand 1，PD-L1)又称CD274，为B7家族成员，是PD-1的配体。PD-L1属于I型跨膜蛋白，共290个氨基酸，包含1个IgV样区、1个IgC样区、1个跨膜疏水区和1个由30个氨基酸组成的胞内区。与其他B7家族分子不同的是，PD-L1具有负向调节免疫应答的作用。研究发现，PD-L1主要表达于活化的T细胞、B细胞、巨噬细胞和树突状细胞等，除淋巴细胞外，PD-L1也表达于其他多种组织如胸腺、心脏、胎盘等的内皮细胞，以及各类非淋巴系如黑色素瘤、肝癌、胃癌、肾细胞癌、卵巢癌、结肠癌、乳腺癌、食道癌、头颈癌等。PD-L1在调节自身反应性T、B细胞和免疫耐受方面具有一定广泛性，并且在外周组织T和B细胞应答起作用。PD-L1在肿瘤细胞上的高表达与癌症患者的不良预后相关。

此外，肿瘤坏死因子受体超家族(4-1BB)又名CD137，或TNFRF9，是TNF受体家族的成员之一。4-1BB是一个阅读框含有255个氨基酸(NCBI：NP_001552)的I型跨膜蛋白，由含有17个氨基酸的N端信号肽，169个氨基酸的胞外区，27个氨基酸的跨膜区和42个氨基酸的C端胞内区组成。4-1BB分子主要表达在活化的T细胞，NK细胞，调节性T细胞，树突状细胞，单核细胞，中性粒细胞和嗜酸性细胞中，肿瘤血管的内皮细胞也有报道表达4-1BB。因此，在肿瘤治疗和一些自身免疫性疾病的治疗中，4-1BB也是一个重要的靶点。

目前上市在售的抗体药物多为单克隆抗体，治疗性单克隆抗体已被用于治疗癌症、自身免疫病、炎症和其他疾病，多数是针对一个靶标的特异性。然而，病人接受单克隆抗体治疗可能产生耐药性或无应答。并且有些疾病在体内的影响因素是多方面的，包括不同的信号通路、不同的细胞因子和受体的调节机制等，单一靶点的免疫疗法似乎并不足以摧毁癌细胞。因此，需要通过组合不同的药物，或是使用多特异性抗体的多重靶向策略来实现。

双功能抗体虽然是抗体药物研发的方向，但面临诸多挑战，比如临床前评价模型、表达量低、稳定性差、工艺复杂、质控差异性大等问题，因此一直以来双功能抗体的研发困难重重。

因此，本领域迫切开发一种特异性佳、疗效好且易于制备的抗肿瘤双特异性抗体。

发明内容

本发明的目的就是提供一种特异性佳、疗效好且易于制备的抗肿瘤双特异性抗体。

在本发明的第一方面，提供了一种双特异性抗体，所述双特异性抗体包括：

(a)抗PD-L1单域抗体；和

(b)抗4-1BB单域抗体。

在另一优选例中，所述的双特异性抗体包括1-3个抗PD-L1单域抗体，较佳地，包括1或2个抗PD-L1单域抗体。

在另一优选例中，所述的PD-L1单域抗体可以阻断PD-1和PD-L1的相互作用。

在另一优选例中，所述的双特异性抗体包括1-3个抗4-1BB单域抗体，较佳地，包括1或2个抗4-1BB单域抗体。

在另一优选例中，所述的4-1BB单域抗体能够激活免疫细胞。

在另一优选例中，所述的双特异性抗体还包含源自人免疫球蛋白的Fc区。

在另一优选例中，所述的人免疫球蛋白选自下组：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，或其组合；优选地为IgG1。