[发明专利]免疫调节特异性嵌合抗原受体细胞及制备方法和应用

权利要求书

1.人免疫检查点调节联合特异性靶向人NKG2DL的嵌合抗原受体，其特征在于：所述的嵌合抗原受体为：

靶向人NKG2DL蛋白的胞外识别结构域氨基酸序列：SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ IDNo.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6或SEQ ID No.7所示的氨基酸序列；免疫检查点调节PD1的氨基酸序列为：SEQ ID No.16、SEQ ID No.17或SEQ ID No.18所示的氨基酸序列；从氨基端到羧基端顺次连接的引导序列的氨基酸序列、靶向结合人NKG2DL蛋白的胞外识别结构域氨基酸序列、铰链区氨基酸序列、跨膜结构域氨基酸序列、胞内信号结构域氨基酸序列、Furin-2A的氨基酸序列和免疫检查点调节PD1的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于：所述跨膜结构域为CD8跨膜结构区、或CD28跨膜结构区、或4-1BB跨膜结构区、或OX40跨膜结构区、或ICOS跨膜结构区；

其中所述胞内信号结构域为免疫受体酪氨酸活化基序和共刺激信号域；

所述免疫受体酪氨酸活化基序为CD3ζ链的胞内信号结构域或FcεRIγ胞内信号结构；

所述共刺激信号域为CD28胞内信号结构域、4-1BB胞内信号结构域、OX40胞内信号结构域或ICOS胞内信号结构域；

所述共刺激信号域为CD28和4-1BB胞内信号结构域、或4-1BB和OX40胞内信号结构域、或CD28和OX40胞内信号结构域。

3.一种编码权利要求2所述的嵌合抗原受体的核酸分子，其特征在于：

所述的核酸分子为从5’到3’依次串联连接的所述引导序列的核苷酸序列、靶向人NKG2DL胞外识别结构域的核苷酸序列、铰链区的核苷酸序列，所述跨膜结构域的核苷酸序列、所述胞内信号结构域的核苷酸序列、Furin-2A的核苷酸序列、所述免疫检查点调节PD1的核苷酸序列。

4.一种免疫检查点调节联合特异性靶向人NKG2DL的嵌合抗原受体的重组载体，其特征在于包含权利要求3中所述的核酸分子。

5.一种重组病毒，其特征在于包括权利要求4所述的重组载体和病毒颗粒；所述病毒包括慢病毒、腺病毒、腺联病毒或逆转录病毒。

6.一种功能化免疫应答细胞，其特征在于其是通过采用如权利要求5所述的重组病毒感染免疫效应细胞获得；所述免疫效应细胞包括细胞毒性T淋巴细胞、NK细胞、NKT细胞、辅助性T细胞或巨噬细胞。

7.一种生物制品，其特征含有权利要求2所述的氨基酸序列；或含有权利要求3所述的核酸分子；或含有权利要求4所述的重组载体；或含有权利要求5所述的重组病毒；或含有权利要求6所述的免疫细胞。

8.根据权利要求7所述的生物制品在制备治疗癌症、自身免疫疾病或抗病毒细菌感染药物中的应用。

9.根据权利要求8 所述的应用，其特征在于所述的癌症为胰腺癌、胃癌、肝癌、脑癌、前列腺癌、淋巴癌、白血病、肠癌、肺癌、宫颈癌、卵巢癌、膀胱癌、食道癌、肾癌或乳腺癌。