[发明专利]一种梨果实中可溶性糖酸的定性检测方法

说明书

本发明提供了一种梨果实中可溶性糖酸的定性检测方法，属于有机检测技术领域。本发明中可溶性糖酸的测定采用超高效液相色谱检测(UPLC)，本发明通过精确限定了超高效液相色谱检测的条件，实现了可溶性糖和有机酸的定性检测，且该方法中可溶性糖的测定可控制在14min内出峰完全，有机酸的测定可控制在5min内出峰完全，比目前常规的高效液相色谱法(HPLC)(可溶性糖在20min出峰，有机酸在15min出峰)更节约时间，自动化程度高、重复性好，可推广到今后果实糖酸含量及组分的研究中，能够实现梨果实中糖酸含量大批量检测。

技术领域

本发明涉及有机检测技术领域，尤其涉及一种梨果实中可溶性糖酸的定性检测方法。

背景技术

梨属于蔷薇科(Rosaceae)梨亚科(Pomaceae)梨属(Pyrus)植物，是世界上重要的落叶果树之一。在我国，梨是继苹果和柑橘之后的第三大水果。糖酸是果实内在品质的重要组成部分，其种类、含量及比例对果实的商品价值及口感风味起着决定性作用，一直以来深受人们关注，也是广大科研工作者一直致力于改良的重要指标之一。对梨果实中糖酸含量及组分的研究，有助于了解梨果实内在品质的形成因素及不同品种间糖酸含量和组分的差异，从而筛选出品质优良的亲本，加快育种进程。

现有的梨果实糖酸定性检测方法有蒽酮比色法、菲林试剂比色法、高效毛孔管电泳法、二硝基水杨酸法、氢氧化钠滴定法和高效液相色谱法(HPLC)，但它们存在检测时间长的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种梨果实中可溶性糖酸的定性检测方法。本发明提供的定性检测方法能够实现可溶性糖酸的具体种类的快速定性测定。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种梨果实中可溶性糖酸的定性检测方法，所述糖包括果糖、山梨糖醇、葡萄糖和蔗糖，所述酸为有机酸，所述有机酸包括草酸、奎宁酸、苹果酸、莽草酸和柠檬酸，包括以下步骤：

将梨果实样品、水和研磨介质混合后依次进行研磨、浸提、加热和自然冷却至室温，得到待测液；

将所述待测液进行第一超高效液相色谱检测，得到梨果实样品中可溶性糖的种类，所述第一超高效液相色谱检测的条件包括：

高效液相条件包括：色谱柱：UPLCACQUITYBEHAmide；流动相：乙腈-氨水混合液与水按照体积比85:15组成，所述乙腈-氨水混合液中氨水的质量分数为1％，流速：0.2mL·min^-1，柱温：45℃，进样时间：15min，进样体积：2μL；

检测条件包括：ELSD检测器，气体压力：25Psi，漂移管温度：55℃，喷雾器：25℃；

将所述待测液进行第二超高效液相色谱检测，得到梨果实样品中有机酸的种类，所述第二超高效液相色谱检测的条件包括：

高效液相条件包括：色谱柱：ACQUITYUPLCHSST3；流动相：磷酸二氢钾溶液-甲醇，所述流动相中磷酸二氢钾的浓度为20mmol/L，甲醇的质量分数为1％，所述流动相的pH值＝2.4，流速：0.25mL·min^-1，柱温：30℃，进样时间：5min，进样体积：2μL；

检测条件包括：PDA检测器，波长：214nm。

优选地，所述梨果实样品与水的用量比为0.5～1.0g：2～4mL。

优选地，所述研磨介质为陶瓷珠，所述陶瓷珠的粒径为2～3mm。

优选地，所述研磨的转速为6～8m·s^-1，时间为45～60s。

优选地，所述浸提在超声条件下进行，所述浸提的时间为15～20min。

优选地，所述加热的温度为80～90℃，所述加热的保温时间为30～35min。