[发明专利]一种制备琼脂糖的方法

说明书

本发明涉及一种制备琼脂糖的方法，该方法包括：将江蓠菜洗净后进行碱处理、酸化处理、漂白处理、煮胶、过滤、冷却凝固，以便获得胶体；将所述胶体搅碎；向搅碎后的胶体加水，加热，调pH，再缓慢滴加顺丁烯二酸酐乙醇溶液进行反应，反应结束后过滤，使用无水乙醇和去离子水交替洗胶粒样品，反复洗涤至洗液pH呈中性，胶粒样品再进行冷冻、脱水、干燥、粉碎，得琼脂糖。该方法可使琼脂的硫酸基团含量显著降低，凝胶强度升高，电内渗显著降低，达到市售的琼脂糖指标要求，反应时间短，环保。

技术领域

本发明涉及海藻深加工技术领域，具体涉及一种制备琼脂糖的方法。

背景技术

琼脂糖是一种多糖聚合物，是琼脂的主要成分，其基本结构为重复交替的1,3-连接的β-D-半乳糖和1,4-连接的3,6-脱水-α-L-半乳糖。琼脂糖为白色或者微黄色粉末，无臭，无味，在热水中的溶解性较好，亦能溶于二甲基亚砜(DMSO)。与琼脂相比，琼脂糖含负电基团较少，性质更为优良，具有高凝胶强度，低硫酸根含量，低电内渗等特点，这些性质也使得琼脂糖在生物、医学等领域具有广泛的应用。

20世纪60年代，瑞典的一位科学家第一次分离出琼脂糖，从此各国研究学者开始了对琼脂糖制备技术的探究。目前，琼脂糖的制备方法总体上可以分为硫琼脂沉淀法、琼脂糖沉淀法和离子色谱法。硫琼脂和琼脂糖是琼脂的两个主要组成成分，沉淀法主要是利用硫琼脂和琼脂糖在盐类和醇类溶液中的溶解性质差异，达到分离琼脂糖的目的，具有代表性的是EDTA-Na₂法、聚乙二醇法。离子色谱法主要是利用阴离子交换树脂通过吸附酸性多糖，不吸附中性多糖琼脂糖，从而达到分离琼脂糖的目的。但上述方法在生产琼脂糖过程中存在一定弊端，其原料琼脂往往都需要海藻经传统碱处理工艺提取制作成琼脂粉后再进一步进行改性，存在生产周期长、生产工艺繁琐、成本较高等问题。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。

为此，根据本发明的实施例，本发明提出了一种制备琼脂糖的方法，其包括以下步骤：

(1)将江蓠菜洗净后进行碱处理、酸化处理、漂白处理、煮胶、过滤、冷却凝固，以便获得胶体；

(2)将所述胶体搅碎；

(3)向搅碎后的胶体加水，加热，调pH，再缓慢滴加顺丁烯二酸酐乙醇溶液进行反应，反应结束后过滤，使用无水乙醇和去离子水交替洗胶粒样品，反复洗涤至洗液pH呈中性，胶粒样品再进行冷冻、脱水、干燥、粉碎，得琼脂糖。

根据本发明实施例的制备琼脂糖的方法，采用一步法以江蓠海藻为原料提取制备琼脂糖，与传统工艺固体琼脂粉末提取琼脂糖相比，本发明在传统碱工艺提取琼脂过程中对胶体进行顺丁烯二酸酐处理，直接从原料海藻提取制备琼脂糖，减少了中间生产环节，缩短生产周期，节约生产成本。

与传统碱工艺提取琼脂样品相比，通过在碱工艺提取过程中对胶体进行顺丁烯二酸酐处理，使得提取出来的样品的硫酸根含量进一步降低，下降了74.5％，达到0.26％，凝胶强度较传统碱工艺提取样品提高，达1056g/cm²，电内渗降低了40％，样品品质得到进一步提高；并且经过顺丁烯二酸酐处理后的样品DNA琼脂糖凝胶电泳分离效果较好，与市售琼脂糖无差异。

另外，根据本发明上述实施例提出的制备琼脂糖的方法，还可以具有如下附加的技术特征：

可选地，步骤(3)中，加热的温度范围为30℃～70℃。

可选地，步骤(3)中，pH的调节范围为3.0～12.0。

可选地，步骤(3)中，胶体与顺丁烯二酸酐反应的时间范围为0.5h～2.5h。

可选地，步骤(3)中，顺丁烯二酸酐乙醇溶液的加入量为顺丁烯二酸酐质量占总反应液体积1％～5％。

可选地，步骤(3)中，胶体与水的料液比为1g:2mL。