[发明专利]牛结节性皮肤病的竞争ELISA抗体检测试剂盒及制备方法

权利要求书

1.一种牛结节性皮肤病的竞争ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括：包被有GTPV-ORF117编码的抗原蛋白的酶标板、竞争抗体、酶标二抗、及显色底物。

2.根据权利要求1所述的牛结节性皮肤病的竞争ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于GTPV-ORF117编码的抗原蛋白为重组蛋白，所述的竞争抗体为抗GTPV-ORF117蛋白的兔多克隆抗体，所述的酶标二抗为以HRP标记的鼠抗兔抗体。

3.根据权利要求1或2所述的牛结节性皮肤病的竞争ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于试剂盒内还有样品稀释液、其中含有吐温的磷酸缓冲液、酶底物TMB和终止液2M的硫酸。

4.权利要求1至3所述的任一牛结节性皮肤病的竞争ELISA抗体检测试剂盒制备方法，其特征在于以山羊痘病毒GTPV提取的基因组DNA为模板，以SEQ ID No.1和SEQ ID No.2为引物扩增得到ORF117胞外区扩增片段，将扩增片段酶切构建到pET-30a原核表达载体中，重组质粒转化BL21(DE3)感受态，制备ORF117胞外区蛋白并包被于酶标板上，封闭；以ORF117胞外区蛋白免疫兔子，收集抗ORF117蛋白兔血清制备竞争抗体，并以鼠抗兔HRP-IgG为酶标二抗。