[发明专利]一种基于量子点标记的检测试纸条及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种基于量子点标记的试纸条，包括样品垫、硝酸纤维素膜NC膜、吸水纸及背板，NC膜粘贴在背板上，样品垫与吸水纸分别粘贴于NC膜两端，并与NC膜边缘重合2-4mm，其特征在于，所述NC膜上有检测线T线及质控线C线，所述T线与C线间隔5mm，所述T线喷涂有链霉亲和素与生物素修饰适配体互补链的结合物，所述C线喷涂有链霉亲和素与生物素修饰PolyA的结合物。

2.一种如权利要求1所述基于量子点标记的试纸条的制备方法，其特征在于，具体制备方法如下所示：

S1：首先将NC膜贴在背板上，然后分别将样品垫及吸水纸贴在NC膜上下两侧，覆盖住NC膜边缘约2-4mm；

S2：取50μL 0.125mg/mL链霉亲和素SA溶液，加入生物素修饰适配体互补链得到结合物溶液1；取50μL 0.125mg/mL链霉亲和素SA溶液，加入生物素修饰Poly A得到结合物溶液2，分别将溶液1和溶液2于摇床中37℃、180RPM孵育过夜，利用BioDot XYZ 3050三维喷点仪将孵育好的结合物溶液1和结合物溶液2分别以1.0μL/cm喷涂量喷涂在NC膜的T线和C线上，得到喷涂好的试纸；

S3：将步骤S2中喷涂好的试纸在37℃条件下烘2h，使T线及C线固定于NC膜上，最后利用切条机将试纸裁切为4mm宽的试纸条，并放置于4℃冰箱备用。

3.根据权利要求2中所述的制备方法，其特征在于，S2中溶液1的浓度为：0.15-0.3μM；溶液2的浓度为：0.15-0.3μM。

4.一种基于量子点标记的检测试纸条在检测沙门氏菌中的应用。

5.根据权利要求4中所述的应用，其特征在于，具体的应用方法如下：

步骤1：取30μL待测样品与50μL信号探针混合，并在37℃、180RPM振荡孵育2.5h后得到混合液，之后取30μL混合液滴加在样品垫上，15min后使用50μL重悬缓冲液进行冲洗，紫外灯箱下观察结果。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的信号探针通过以下方法制备得到：

取ZnS:Mn量子点溶液，加入4μL的100μM沙门氏菌氨基适配体溶液并混合得到混合液，并将混合液避光置于37℃摇床中，180RPM振荡孵育16h，待孵育完毕后，将其在4℃、8000r/min离心机中离心3min，去除未连接适配体，并将沉淀物重新分散于重悬缓冲液中，避光4℃保存备用，即得所述信号探针。

7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于，所述重悬缓冲液为PBS缓冲液，所述缓冲液的pH值为7.4，其中组份包括0.5％PEG、0.25％吐温-20、5％蔗糖、0.02％MgSO₄、0.05％(NH₄)₂SO₄。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述ZnS:Mn量子点溶液的浓度为5-10mg/mL；所述ZnS:Mn量子点与沙门氏菌氨基适配体质量摩尔比1.25-2.5×10⁷g/mol。