[发明专利]一种用于检测奥司他韦耐药突变的引物、探针及检测方法

权利要求书

1.一种用于检测奥司他韦耐药突变的引物和探针，其特征在于，所述引物和探针为：

正向引物F：

5’-ATGTGCATGTGTAAATGGTTCTTGCTTTAC-3’；

反向引物及探针P：

5’-GAATCAGGGTAACAGGAGCATTCCTCATAG[FAM-dT]A[THF][BHQ1-dT]AATTAGGGGCTTTCA[C3-spacer]-3’。

2.如权利要求1所述的用于检测奥司他韦耐药突变的引物和探针，其特征在于，FAM-dT表示携带了荧光素基团FAM的胸腺嘧啶脱氧核苷酸；

THF表示四氢呋喃；

BHQ-dT表示携带了荧光淬灭基团BHQ的胸腺嘧啶脱氧核苷酸；

C3-spacer表示3’末端碱基由磷酸阻滞剂修饰。

3.一种用于检测奥司他韦耐药突变的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

核酸提取；

以上述的核酸样本为模板，利用权利要求1或2的引物和探针分别进行荧光RT-RAA等温扩增反应获得扩增曲线；

对扩增曲线分析，确定是否有奥司他韦耐药突变。

4.如权利要求3所述用于检测奥司他韦耐药突变的检测方法，其特征在于，所述荧光RT-RAA等温扩增反应的反应体系为：

5.如权利要求4所述用于检测奥司他韦耐药突变的检测方法，其特征在于，上述混合液加入到RT-RAA基础反应管中混匀，加入2.5μl 280mM醋酸镁溶液并充分混匀；在39℃条件下反应30min，并实时观察结果。