[发明专利]一种预测CHB患者中HBsAg清除的免疫学指标的检测方法

说明书

本发明公开了一种预测CHB患者中HBsAg清除的免疫学指标的检测方法，包括以下步骤：分子的筛选，初步筛选出评估机体T细胞功能的免疫学指标，收集HBsAg阳性和清除CHB患者以及健康对照的血样；检测方法，收集患者的血样，进行细胞重悬种植，配置抗体；进行流式细胞术的检测，并保存数据，利用软件Flow Jo software V10.0.7进行数据分析；预测效能的评估。本发明成功发现了可预测CHB患者48周内HBsAg阴转的T细胞免疫学指标HLA‑DR。在本发明中，首次利用CD4和CD8T细胞的HLA‑DR的表达水平预测CHB患者48周内的HBsAg阴转，而且其灵敏度和特异度分别高达83.33％和72.34％，对评估CHB患者抗病毒疗效具有重要的临床意义。

技术领域

本发明涉及一种免疫学指标的检测方法，尤其涉及一种预测CHB患者中HBsAg清除的免疫学指标的检测方法，属于医疗免疫学技术领域。

背景技术

乙型肝炎病毒(HBV)仍是一大主要的公共卫生问题，全球超过四亿人感染HBV。世界卫生组织颁布的有关病毒性肝炎全球策略中提出消灭乙型肝炎病毒(HBV)是可能实现的目标。目前，大部分的临床实践指南都推荐慢性乙型肝炎(CHB)治疗最理想的终点是实现功能性治愈，这种治愈定义为乙肝表面抗原(HBsAg)的血清学清除伴或不伴有HBsAg的血清学转换，之所以提出以上目标，是因为达到HBsAg的清除可以制止疾病的进展以及减少原发性肝癌发生的风险。

HBsAg的清除在未接受抗病毒治疗或接受核苷(酸)类似物的CHB患者中发生率极低，近年来随着干扰素α联合或序贯治疗的运用，CHB患者中HBsAg的清除率大大增加。干扰素α主要通过直接抑制感染细胞中RNA和相关蛋白质的产生，以及通过阻断核衣壳蛋白的组装从而抑制病毒的复制。再者，干扰素α还有免疫调节的作用，如调节T细胞、NK细胞的免疫活化等作用。因此，经过核苷(酸)类似物长期有效抗病毒治疗后的CHB患者接受干扰素α治疗主要是通过调节机体的免疫功能来达到更好的抗病毒作用，甚至是HBsAg的清除。

干扰素α治疗主要是通过调节机体免疫功能来实现HBsAg的快速下降及清除的，目前临床上尚缺乏免疫学上相关的监测指标来综合评估患者抗病毒疗效。目前不少的研究干扰素α在CHB患者中抗病毒作用的免疫学机制，但是对于干扰素α在CHB患者中实现HBsAg清除的机制演剧较少，且尚未发现有效评估或者预测CHB患者抗病毒疗效的免疫学指标。对于联合或序贯干扰素α治疗的患者，目前临床上主要通过检测HBV相关的病毒学指标及生化指标来评估其抗病毒的疗效及预后，以上指标预测效果欠佳且较滞后。开展一项简易且实用的免疫学指标的检测项目的方法将有利于更加全面地评估患者的免疫学功能，结合临床现有的病毒和生化相关指标评估患者的抗病毒状态和疗效，从而辅助发现潜在的有望实现HBsAg清除的潜在优势人群，进一步优化抗病毒治疗方案，从而使更多的患者实现HBsAg的清除。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种预测CHB患者中HBsAg清除的免疫学指标的检测方法。

为了实现上述目的，本发明采用下述的技术方案：

一种预测CHB患者中HBsAg清除的免疫学指标的检测方法，包括以下步骤：

步骤1、分子的筛选：

a、初步筛选出评估机体T细胞功能的免疫学指标；

b、收集HBsAg阳性和清除CHB患者以及健康对照的血样；

步骤2、检测方法：

a、收集患者的血样，进行细胞重悬种植；

b、配置抗体；

c、进行流式细胞术的检测，并保存数据，利用软件Flow Jo software V10.0.7进行数据分析；